臨床免疫學(xué)及檢驗(yàn)授課教案-理論課教案:熒光免疫技術(shù)

教案

授課內(nèi)容(章，節(jié))

題 目

第十八章 熒光免疫技術(shù)

授課教師單位

廣醫(yī)檢驗(yàn)系

教研室

臨床免疫檢驗(yàn)教研室

職稱

主任技師

授課方式

大課面授

授課時(shí)數(shù)

2

授課對(duì)象 檢驗(yàn)系2003本科班

授課時(shí)間

2006.09.18

授課地點(diǎn)

12-2A

采用教材版本

《臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)》呂世靜主編

教學(xué)目的與要求：

1熒光技術(shù)基本原理、熒光基本知識(shí)、常用熒光素的特點(diǎn)和

要求。

2熒光抗體技術(shù)要點(diǎn)、抗體要求及標(biāo)記的原理。

3熒光免疫測(cè)定方法的分類及原理。

4熟悉內(nèi)容：熒光顯微技術(shù)基本原理。

5了解內(nèi)容：熒光免疫技術(shù)的進(jìn)展。

授課內(nèi)容(要點(diǎn))

1 一般講授熒光的一些基本概念和基本知識(shí)：熒光的產(chǎn)生，熒光素的熒光特性，影響熒光的因素，常用熒光素及其特性，合適熒光素的選擇 。

2 重點(diǎn)講解熒光抗體的制備：熒光素與抗體結(jié)合，熒光抗體的純化，熒光抗體的鑒定，學(xué)生務(wù)必?zé)晒饪贵w技術(shù)要點(diǎn)、抗體要求及標(biāo)記的原理。

3 一般講授執(zhí)業(yè)護(hù)士網(wǎng)抗原片的制作：臨床常見標(biāo)本，標(biāo)本的固定目的，常用的固定方法。

4重點(diǎn)講解熒光免疫測(cè)定方法的分類及原理：直接法，間接法，補(bǔ)體結(jié)合法的原理。

5 簡(jiǎn)單介紹熒光免疫技術(shù)的其它發(fā)展應(yīng)用：流式細(xì)胞儀，熒光偏振免疫分析技術(shù)，熒光免疫技術(shù)在生物芯片中的應(yīng)用。

6 重點(diǎn)講解新發(fā)展中時(shí)間分辨免疫熒光技術(shù)：時(shí)間分辨免疫熒光技術(shù)基本原理，時(shí)間分辨熒光測(cè)定的特點(diǎn)、測(cè)定技術(shù)類型。

7簡(jiǎn)單介紹熒光免疫技術(shù)的最新發(fā)展應(yīng)用：化學(xué)發(fā)光，上轉(zhuǎn)磷光技術(shù)。

時(shí)間

分配

2h

講課重點(diǎn)和難點(diǎn)（采用何種方式或方法來解決)

重點(diǎn)：1熒光抗體技術(shù)要點(diǎn)、抗體要求及標(biāo)記的原理。

2 熒光免疫測(cè)定方法的分類及原理。

難點(diǎn)：熒光抗體技術(shù)的方法和原理。

采用方式或方法：

1 利用網(wǎng)絡(luò)資源，學(xué)習(xí)理解免疫反應(yīng)的原理。

2 自行制作的動(dòng)畫展現(xiàn)免疫反應(yīng)的微觀世界，讓學(xué)生加深理解反應(yīng)原理。

3介紹學(xué)生閱讀有關(guān)參考文獻(xiàn)，增加知識(shí)面，拓展視野，加深理解，易于記憶。

1)周光炎.免疫學(xué)，第六版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002

2)吳健民.免疫學(xué)檢驗(yàn)——理論與臨床.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

3)吳世靜.免疫學(xué)檢驗(yàn)，第二版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

教學(xué)過程設(shè)計(jì)：（授課中對(duì)以下內(nèi)容采取的措施)

1．  應(yīng)用畫圖解釋熒光的產(chǎn)生，熒光素的熒光特性，影響熒光的因素，讓學(xué)生理解熒光產(chǎn)生的動(dòng)態(tài)過程。

2．  利用表格解釋熒光素的選擇和各種熒光素的特性。

3．  通過流線圖解釋熒光抗體的制備過程，在講授過程中，應(yīng)詳細(xì)解釋每一步的影響因素與注意事項(xiàng)。

4．  利用直觀圖、動(dòng)畫等多媒體技術(shù)，解釋熒光抗體技術(shù)的檢測(cè)原理，本內(nèi)容是學(xué)生撐握的難點(diǎn)，重點(diǎn)要展示微觀反應(yīng)原理。

5．  利用視頻技術(shù)，展示熒光抗體檢測(cè)技術(shù)的操作過程和檢測(cè)流程。

6．  采用對(duì)比的方法講解熒光抗體技術(shù)中直接法、間接法和補(bǔ)體結(jié)合法以及時(shí)間分辨免疫熒光技術(shù)基本原理，時(shí)間分辨熒光測(cè)定的特點(diǎn)、測(cè)定技術(shù)類型。使學(xué)生更容易理解各種檢測(cè)法的特性和應(yīng)用情況。

7．  簡(jiǎn)單介紹熒光免疫技術(shù)的進(jìn)展。

2．啟發(fā)引導(dǎo)學(xué)生思維：

1) 標(biāo)記免疫技術(shù)中各種技術(shù)的異同點(diǎn)。例如ELISA、放射免疫、熒光免疫和金標(biāo)記免疫等

2)復(fù)習(xí)抗原抗體反應(yīng)、凝聚反應(yīng)、沉淀反應(yīng)的特點(diǎn)等基本知識(shí)，引導(dǎo)學(xué)生回顧學(xué)過的知識(shí)，提問學(xué)生：凝聚反應(yīng)、沉淀反應(yīng)的共同點(diǎn)是什么？其檢測(cè)靈敏度達(dá)到什么程度？使學(xué)生容易理解標(biāo)記免疫技術(shù)的特點(diǎn)。

3) 學(xué)生在充分理解熒光抗體技術(shù)的原理及特點(diǎn)基礎(chǔ)上，引導(dǎo)學(xué)生設(shè)計(jì)臨床測(cè)定不同標(biāo)志物的方法。

3．采用英語(yǔ)專業(yè)詞匯：

1)  熒光免疫技術(shù) fluorescence Immunoassay

2)  異硫氰酸熒光素 fluorescein isothiocyanate,FITC

3)  四乙基羅丹明 rhodamine B200,RB200

4)  四甲基異硫氰酸羅丹明 tetramethyl rhodamine isothiocyanate,TRITC

5)  藻紅蛋白 phycoerythrin,PE

6)  時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定 time-resolved fluorescence immunoassay,TR-FIA

7)  熒光酶免疫測(cè)定 fluorescence enzyme immunoassay,FEIA

4．指導(dǎo)學(xué)生自學(xué)：

1) 熒光顯微鏡的使用

2) 熒光抗體技術(shù)中抗原的來源及固定方法及對(duì)檢測(cè)的影響。

5．學(xué)科進(jìn)展內(nèi)容：

1) 熒光免疫技術(shù)在生物芯片中的應(yīng)用和上轉(zhuǎn)磷光技術(shù)是免疫熒光技術(shù)的新發(fā)展，特別是上轉(zhuǎn)磷光技術(shù)，目前僅見國(guó)外報(bào)道，是值得關(guān)注的新動(dòng)向

2) 向?qū)W生扼要介紹生物芯片技術(shù)和上轉(zhuǎn)磷光技術(shù)。

課堂提問設(shè)計(jì)：

1)  凝聚反應(yīng)和沉淀反應(yīng)的特點(diǎn)是什么？檢測(cè)靈敏度如何？

2)  什么是標(biāo)記免疫技術(shù)？

3)  什么是熒光？什么是熒光素？

4)  熒光素如何與抗體結(jié)合？

5)  怎樣進(jìn)行標(biāo)記熒光抗體的純化？如何鑒別是否達(dá)到純化要求？

教師與學(xué)生互動(dòng)的設(shè)計(jì)：

講授與提問結(jié)合，舉臨床實(shí)例說明問題，由淺入深，引導(dǎo)學(xué)生，提高學(xué)生學(xué)習(xí)興趣，調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)積極性。

教學(xué)方法與手段（采用何種直觀教具和數(shù)量)(請(qǐng)打√)

板書設(shè)計(jì)

1 凝聚反應(yīng)、沉淀反應(yīng)：Ag+Ab-----AgAb―――觀察

2 標(biāo)記免疫技術(shù)：Ag+Ab*-----AgAb*―――測(cè)量*，

或：Ag*+Ab-----Ag*Ab―――測(cè)量*，

3 熒光的產(chǎn)生：

  λ2>λ1

幻燈 錄像 √CAI課件 √動(dòng)畫  √視頻   √網(wǎng)絡(luò)

其它：

課時(shí)具體安排：

1 標(biāo)記免疫技術(shù)概念、分類，熒光免疫技術(shù)的概念分類，5min

2 熒光技術(shù)基本原理、熒光基本知識(shí)、常用熒光素的特點(diǎn)和要求。20min

3熒光抗體技術(shù)要點(diǎn)、抗體要求及標(biāo)記的原理。20min

4熒光免疫測(cè)定方法的分類及原理。熒光抗體技術(shù)基本原理。20nin

5 時(shí)間分辨免疫熒光技術(shù)。10min

6熒光免疫技術(shù)的進(jìn)展。5min

教學(xué)改革措施（授課形式、課堂提問、思考題、復(fù)習(xí)提綱、測(cè)試題)

1)面授與提問結(jié)合，強(qiáng)調(diào)須掌握和熟悉的內(nèi)容，可課后給予思考題及測(cè)試題。

2)建議學(xué)生上網(wǎng)，通過我們自行制作的網(wǎng)絡(luò)課件，加深對(duì)課程內(nèi)容的理解。

輔導(dǎo)的問題與難點(diǎn)：

1熒光抗體技術(shù)要點(diǎn)、抗體要求及標(biāo)記的原理。

2www.med126.com 熒光免疫測(cè)定方法的分類及原理。

3熒光抗體技術(shù)的方法和原理。

備課主要參考資料（圖書、文獻(xiàn))：

1)周光炎.免疫學(xué)，第六版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002

2)吳健民.免疫學(xué)檢驗(yàn)——理論與臨床.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

3)吳世靜.免疫學(xué)檢驗(yàn)，第二版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

授課教師對(duì)此次授課的自我評(píng)價(jià)：

本課是臨床免疫檢驗(yàn)課程中基礎(chǔ)理論的主干課，要求教師有較扎實(shí)標(biāo)記免疫技術(shù)理論基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)。此次講授自己能緊緊抓住熒光免疫技術(shù)特點(diǎn)這一主線，重點(diǎn)放在反應(yīng)原理和臨床應(yīng)用的講授上。通過多媒體中的圖片、動(dòng)畫、視頻播放等更形象地展示抗原抗體反應(yīng)的微觀過程，通過彩圖及流線圖更清晰地講解熒光免疫的操作過程和影響因素。最后，結(jié)合臨床經(jīng)驗(yàn)介紹實(shí)際項(xiàng)目的檢測(cè)（例如CD4檢測(cè)等)。

講授過程邏輯性強(qiáng)，條理性好，語(yǔ)言表達(dá)清晰，能適當(dāng)介紹相關(guān)的專業(yè)英語(yǔ)詞匯。在基礎(chǔ)理論講授的同時(shí)，向?qū)W生介紹有關(guān)熒光免疫技術(shù)的相關(guān)研究，如從FITC熒光素到Eu3+再到自動(dòng)化儀器中所應(yīng)用的MuP熒光素的應(yīng)用，從而擴(kuò)大學(xué)生的知識(shí)面。在授課形式上，PPT結(jié)合多媒體播放及適當(dāng)?shù)陌鍟�有機(jī)的結(jié)合，使內(nèi)容更形象、更生動(dòng)、更具體，學(xué)生更易于理解。

學(xué)生評(píng)價(jià)：

條理清楚,邏輯性強(qiáng),講授深入淺出,能將微觀難懂的內(nèi)容講授得通俗易懂.講課形式生動(dòng)活潑,并結(jié)合臨床實(shí)際,使學(xué)生更加容易理解.加入新進(jìn)展內(nèi)容,擴(kuò)大知識(shí)面。

教研室主任評(píng)價(jià)：

教案書寫要求：文字通暢，書寫工整或電腦打印。