藥物分析-授課教案:第七章　芳香胺類藥物分析

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

1.芳胺類藥物的分析

芳香胺類藥物主要分為兩類：對(duì)氨基苯甲酸酯類；酰胺類藥物。

一、 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

(一) 對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物　

　　有對(duì)氨基苯甲酸酯的母體，結(jié)構(gòu)通式如下：

1、典型藥物：

苯佐卡因　　　　  　　　　　　 鹽酸普魯卡因

(Benzocaine)  (Procaine Hydrochloride)

鹽酸丁卡因

(Tetracaine Hydrochloride)

鹽酸普魯卡因胺（抗心律失常藥)化學(xué)性質(zhì)與本類藥物相似。結(jié)構(gòu)如下：  

2、主要化學(xué)性質(zhì)

1)芳伯氨基特性　顯重氮化－偶合反應(yīng)；與芳醛縮合反應(yīng)；易氧化變色等。

2)水解特性 含酯鍵（或酰胺鍵)易水解。

3)弱堿性 除苯佐卡因外，脂烴胺側(cè)鏈為叔胺氮原子，有弱堿性。能與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)；但在水溶液中不能用標(biāo)準(zhǔn)酸直接滴定，在非水溶劑中能滴定。

4)其它特性�！�

講授結(jié)合多媒體教學(xué)

復(fù)習(xí)舊課（3min)；

作業(yè)解析(5min)；

引入新課(2min)；

2min

講解結(jié)構(gòu)通式，引入典型藥物

鹽酸普魯卡因的命名：

4-氨基苯甲酸2-（二乙氨基)乙酯鹽酸鹽

3min

鹽酸丁卡因的命名：

4- (丁氨基) 苯甲酸-2-(二甲氨基) 乙酯鹽酸鹽。

鹽酸普魯卡因胺有命名：

N-〔(2-二乙氨基) 乙基〕－4－氨基苯甲酰胺鹽酸鹽。

7min

生成schiff堿(西fo堿)。P148鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查采用此法顯色(薄層色譜)。

3min

生物堿沉淀反應(yīng)是利用大多數(shù)生物堿在酸性條件下，與某些沉淀劑反應(yīng)生成弱酸不溶性復(fù)鹽或絡(luò)合物沉淀。

生物堿沉淀劑：碘化鉍鉀試劑、改良的碘化鉍鉀試劑等。

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

　　�；�衍生物，共性是具有芳酰氨基，基本結(jié)構(gòu)為：

　　1、典型藥物：對(duì)乙酰氨基酚（撲熱息痛)等解熱鎮(zhèn)痛藥、鹽酸利多卡因和鹽酸布比卡因等局部麻醉藥及醋氨苯砜抗麻風(fēng)藥。結(jié)構(gòu)為：

對(duì)乙酰氨基酚　　  　 醋氨苯砜　　　　　　　

(Paracetamol)  (Acedapsone)

鹽酸利多卡因　　 　  　　　　鹽酸布比卡因　

(Lidocaine Hydrochloride)    (Bupivacaine Hydrochloride)

2、主要化學(xué)性質(zhì)

　  1)水解后顯芳伯氨基特性　易水解為芳伯氨基，并顯芳伯氨基特性反應(yīng)。水解反應(yīng)的速度受空間位阻影響。

　  2)水解產(chǎn)物易酯化　對(duì)乙酰氨基酚→醋酸→醋酸乙酯的香味。

3)酚羥基特性　對(duì)乙酰氨基酚(FeCl3)。

4)弱堿性　利多卡因和布比卡因的脂烴胺側(cè)鏈有叔胺氮原子，顯堿性，可以成鹽，與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)。

　　5)與重金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)　鹽酸利多卡因等酰氨基上的氮可在水溶液中與銅離子或鈷離子絡(luò)合，生成有色的配位化合物沉淀。

　　此外，本類藥物的紫外吸收和紅外吸收光譜特征均可供分析用。

2min

醋氨苯砜的命名：

4,4’-磺�；�雙（乙酰苯胺)

鹽酸利多卡因：N-（2,6-二甲苯基)－ 2－（二乙氨基)乙酰胺鹽酸鹽一水合物。

鹽酸布比卡因：N-（2,6-二甲苯基)－ 2－（二乙氨基)乙酰胺鹽酸鹽一水合物。

3min

利多卡因和醋氨苯砜無(wú)酚羥基特性，可區(qū)別。

基本內(nèi)容

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手段和時(shí)間分配)

(一) 重氮化－m.bhskgw.cn/yaoshi/偶合反應(yīng)

分子結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成的重氮鹽可與堿性β－萘酚偶合生成有色的偶氮染料。

苯佐卡因、鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡因胺(鹽酸溶液中) + 亞硝酸鈉進(jìn)行重氮化反應(yīng)；

對(duì)乙酰氨基酚和醋氨苯砜(鹽酸或硫酸)加熱水解 + 亞硝酸鈉進(jìn)行重氮化反應(yīng)。

如鹽酸普魯卡因的鑒別反應(yīng)如下：　

對(duì)乙酰氨基酚的鑒別方法：

(紅色)

鹽酸丁卡因結(jié)構(gòu)中的芳香仲胺在酸性溶液中與亞硝酸鈉反應(yīng)，生成乳白色的 N－亞硝基化合物沉淀

1min

通過(guò)對(duì)化學(xué)性質(zhì)的分析，引入鑒別試驗(yàn)。

提示：具有芳伯氨基及潛在芳伯氨基的藥物處理方法不同。

5min

可與具有芳伯氨基的同類藥物區(qū)別

此處鹽酸丁卡因作為一特例講解。

基本內(nèi)容

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手段和時(shí)間分配)

對(duì)乙酰氨基酚

【鑒別】  (1) 本品的水溶液加三氯化鐵試液，即顯藍(lán)紫色。   

(三) 與重金屬離子反應(yīng)

1.與Cu²⁺和Co²⁺反應(yīng)　鹽酸利多卡因，在碳酸鈉試液中，與硫酸銅反應(yīng)生成藍(lán)紫色配位化合物，溶于氯仿則顯黃色。（鹽酸普魯卡因、鹽酸丁卡因和苯佐卡因等無(wú)此反應(yīng))。

鹽酸利多卡因：[中國(guó)藥典(2005年版)]

^【鑒別】 

    (2) 取溶液2ml ，加硫酸銅試液0.2ml 與碳酸鈉試液1ml,即顯藍(lán)紫色；加氯仿2ml,振搖后放置，三氯化碳層顯黃色。

鹽酸利多卡因，在酸性溶液中與氯化鈷試液反應(yīng)，生成亮綠色細(xì)小鈷鹽沉淀。(藥典)

2. 與Hg²⁺反應(yīng)　鹽酸利多卡因 + 硝酸汞試液煮沸→顯黃色；對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物顯紅色或橙黃色，可與之區(qū)別。

3. 羥肟酸鐵鹽反應(yīng)　鹽酸普魯卡因胺分子中具有芳酰胺結(jié)構(gòu)，加入濃過(guò)氧化氫溶液，緩緩加熱至沸后，先被氧化成羥肟酸，再與三氯化鐵作用形成配位化合物羥肟酸鐵，其溶液顯紫紅色，隨即變?yōu)榘底厣�至棕黑色。中�?guó)藥典2005年版采用本法鑒別鹽酸普魯卡因胺。

5min

復(fù)習(xí)無(wú)機(jī)化學(xué)中及前幾次課中的相關(guān)知識(shí)：

此處配位單元本身就是配合物。此處配位單元本身就是配合物。配位單元是由一定數(shù)目含有孤對(duì)電子的分子或離子與金屬離子以配位鍵結(jié)合而成的結(jié)構(gòu)單元。配位單元如帶電荷叫配離子，它能再與電荷相反的離子形成配合物。配位單元如不帶電荷稱為配位分子，這時(shí)配位單元本身就是配合物。

2min

鹽酸普魯卡因、鹽酸丁卡因和苯佐卡因等無(wú)Cu²⁺和Co²⁺反應(yīng)

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手段和時(shí)間分配)

(四) 水解產(chǎn)物反應(yīng)

　　本類藥物分子中有些具有酯的結(jié)構(gòu)，在堿性條件下水解，利用其水解產(chǎn)物與試劑的反應(yīng)進(jìn)行鑒別。中國(guó)藥典2005年版采用此法鑒別鹽酸普魯卡因、苯佐卡因。

1. 鹽酸普魯卡因的鑒別方法　取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10％氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀，加熱變?yōu)橛蜖钗铮ㄆ蒸斂ㄒ?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸汽（二乙氨基乙醇)能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后（生成可溶于水的對(duì)氨基苯甲酸鈉)，放冷，加酸酸化，即析出白色沉淀。此沉淀能溶于過(guò)量的鹽酸。

2. 苯佐卡因的鑒別方法

(五) 制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)

1.三硝基苯酚衍生物  鹽酸利多卡因與三硝基苯酚反應(yīng)，生成能難溶于水的三硝基苯酚利多卡因黃色沉淀；濾過(guò)，沉淀用水洗滌后，105℃干燥后，熔點(diǎn)約為228～232℃。鹽酸布比卡因與三硝基苯酚按此法制備的三硝基苯酚布比卡因衍生物，其熔點(diǎn)約為194℃。

鹵仿反應(yīng)：乙醛或甲基酮在堿性條件下與鹵素作用(常用次鹵酸鈉如NaOI或鹵素的堿溶液如Br2+OH-)，三個(gè)α氫原子可完全被鹵素取代。特別是生成的碘仿，為難溶于水的黃色固體，并有特殊臭味，極易識(shí)別。

2min

此處的熔點(diǎn)測(cè)定為鑒別，其自身的熔點(diǎn)為性狀。

如鹽酸利多卡因：

【性狀】

熔點(diǎn)  本品的熔點(diǎn)（附錄Ⅵ C)為75～79℃。

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手段和時(shí)間分配)

中國(guó)藥典(2005年版)鹽酸利多卡因的鑒別：

【鑒別】  取本品0.2g，加水20ml溶解后，照下述方法試驗(yàn)。  

(1) 取溶液10ml，加三硝基苯酚試液10ml，即生成沉淀；濾過(guò)，沉淀用水洗滌后，干燥，依法測(cè)定（附錄Ⅵ C)，熔點(diǎn)為228 ～232 ℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。

2.硫氰酸鹽衍生物

中國(guó)藥典(2005年版)鹽酸丁卡因的鑒別：

【鑒別】  (1) 取本品約0.1g，加5 ％醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25％硫氰酸銨溶液1ml,即析出白色結(jié)晶；濾過(guò)，結(jié)晶用水洗滌，在80℃干燥，依法測(cè)定（附錄Ⅵ C)，熔點(diǎn)約為131 ℃。

(六) 紫外特征吸收光譜

2min

3min

請(qǐng)同學(xué)注意：此表中Ch.P(2005)中對(duì)乙酰氨基酚的UV圖譜是用于含量測(cè)定，而非教材中所寫(xiě)的用于鑒別。

基本內(nèi)容

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手段和時(shí)間分配)

(七) 紅外吸收光譜

以鹽酸普魯卡因與鹽酸普魯卡因胺的紅外圖譜為例說(shuō)明。

   圖 鹽酸普魯卡因與鹽酸普魯卡因胺的紅外吸收光譜(氯化鉀壓片法)

表  鹽酸普魯卡因與鹽酸普魯卡因胺的紅外吸收光譜的主要區(qū)別

四、雜質(zhì)檢查

(一) 對(duì)乙酰氨基酚的雜質(zhì)檢查

合成工藝：A、對(duì)硝基氯苯→水解→對(duì)硝基酚→還原→對(duì)氨基酚→乙�；�，制得；B、酚→亞硝化、還原→對(duì)氨基酚，乙酰化。在生產(chǎn)過(guò)程中除可能引入一般雜質(zhì)外，還可能引入特殊的雜質(zhì)。

5min

強(qiáng)調(diào)：

酯羰基、酯基與酰胺基在光譜上的不同。

8min

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注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

　　檢查方法　取本品1.0g，加乙醇10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清，無(wú)色；如顯渾濁，與1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色，與棕紅色2號(hào)或橙紅色2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)液比較,不得更深。

2. 有關(guān)物質(zhì)  主要包括中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物。例如：對(duì)氨基酚、對(duì)氯乙酰苯胺、O-乙�；鶎�(duì)乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亞胺等。以對(duì)硝基氯苯為原料，可能引入對(duì)氯乙酰苯胺，藥典采用薄層色譜法對(duì)此項(xiàng)雜質(zhì)進(jìn)行限度檢查。

　　檢查方法 取本品的細(xì)粉1.0g，置具塞離心管或試管中，加乙醚5ml，立即密塞，振搖30分鐘，離心或放置澄清，取上清液作為供試品溶液；另取每 1ml中含對(duì)氯乙酰苯胺1.0mg的乙醇溶液適量，用乙醚稀釋成每1ml中含50μg的溶液作為對(duì)照液。吸取供試品溶液200μl與對(duì)照溶液40μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254 薄板上。以氯仿－丙酮－甲苯（13:5:2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，晾干，置紫外光燈（254nm)下檢視，供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更大，更深。

3.對(duì)氨基酚 本品在合成過(guò)程中，由于乙�；�不完全或貯藏不當(dāng)發(fā)生水解，均可引入對(duì)氨基酚，使本品產(chǎn)生色澤并對(duì)人體有毒性，應(yīng)嚴(yán)格控制其限量。

利用對(duì)氨基酚在堿性條件下可與亞硝基鐵氰化鈉生成藍(lán)色配位化合物，而對(duì)乙酰氨基酚無(wú)此反應(yīng)的特點(diǎn)，與對(duì)照品比較，進(jìn)行限量檢查。

檢查方法 取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2)20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1ml，搖勻，放置30min；如顯色，與對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品1.0g加對(duì)氨基酚50μg用同一方法制成的對(duì)照液（臨用配制)比較，不得更深(0.005％)。

比色：檢查中間體對(duì)氨基酚；

比濁：檢查還原劑鐵粉。

此檢查方法應(yīng)參考。因?qū)σ阴０被�酚中除�?duì)氨基酚外，還可能有其它副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物。例如：苯醌和醌亞胺等。因此采用平行的原則即對(duì)照品對(duì)乙酰氨基酚加對(duì)氨基酚的方法排除其它雜質(zhì)的干擾。

提醒學(xué)生借鑒其檢查方法

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手段和時(shí)間分配)

雜質(zhì)來(lái)源  水解產(chǎn)生

檢查方法  TLC  雜質(zhì)對(duì)照品法 限度不得超過(guò)1.2％。

五、含量測(cè)定

(一) 亞硝酸鈉滴定法

中國(guó)藥典（2005年版)收載用本法測(cè)定含量的有：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因及其片劑，鹽酸普魯卡因胺及其片劑與注射液，醋酸氨苯砜及其注射液。

1. 原理　芳伯氨基藥物在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量反應(yīng)，生成重氮鹽。

2.測(cè)定的主要條件　

　　1)加入適量溴化鉀加快反應(yīng)速度：在鹽酸存在下，重氮化反應(yīng)的歷程為：

慢 快 快

整個(gè)反應(yīng)的速度取決于第一步，而第一步反應(yīng)的快慢與含芳伯氨基化合物中芳伯氨基的游離程度有密切關(guān)系。如芳伯氨基的堿性較弱，則在一定強(qiáng)度酸性溶液中成鹽的比例較小，即游離芳伯氨基多，重氮化反應(yīng)速度就快；反之，則游離芳伯氨基較少，重氮化反應(yīng)速度就慢。所以，在測(cè)定中一般向供試溶液中加入適量溴化鉀（中國(guó)藥典規(guī)定加入2g)，使重氮化反應(yīng)速度加快。

　　溴化鉀與鹽酸作用產(chǎn)生溴化氫，后者與亞硝酸作用生成NOBr：

HNO₂ ＋ HBr → NOBr ＋H₂O 　　　　(1)

若供試溶液中僅有HCl，則生成NOCl：

　　　　　　　 HNO₂ ＋ HCl → NOCl ＋H₂O　　　　　 (2)

由于(1)式的平衡常數(shù)比(2)式的約大300倍，即生成的NOBr量大得多，也就是在供試液中NO+的濃度大得多，從而加速了重氮化反應(yīng)。     

亞硝酸鈉法用時(shí)15min，其他4種方法分別用時(shí)3min,含量測(cè)定共計(jì)用時(shí)27min。

具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測(cè)定。

具潛在芳伯氨基的藥物，如芳香族硝基化合物（如無(wú)味氯霉素)經(jīng)還原，也可用本法測(cè)定。

具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對(duì)乙酰氨基酚等)經(jīng)水解，也可用本法測(cè)定。

復(fù)習(xí)：

在一定溫度下，可逆反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)，生成物的濃度以反應(yīng)方程式中該物質(zhì)分子式前的系數(shù)為乘冪的乘積與反應(yīng)物的濃度以反應(yīng)方程式中該物質(zhì)分子式前的系數(shù)為乘冪的乘積之比是一個(gè)常數(shù)，這個(gè)關(guān)系叫化學(xué)平衡定律，這個(gè)常數(shù)叫平衡常數(shù)。

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

酸度加大，反應(yīng)向左進(jìn)行，故可以防止偶氮氨基化合物的生成。若酸度過(guò)大，又可阻礙芳伯氨基的游離，反而影響重氮化反應(yīng)速度。在太濃的鹽酸中還可使亞硝酸分解。所以，加入鹽酸的量一般按芳胺類藥物與酸的摩爾比約為1:2.5～6。

3) 室溫（10～30℃)條件下滴定：通常溫度高，重氮化反應(yīng)速度快；但溫度太高，可使亞硝酸逸失，并可使重氮鹽分解：

　　4)滴定管尖端插入液面下滴定：重氮化反應(yīng)為分子反應(yīng)，反應(yīng)速度較慢，故滴定不宜過(guò)快。為了避免滴定過(guò)程中亞硝酸揮發(fā)和分解，滴定時(shí)將滴定管尖端插入液面下約2/3處，一次將大部分亞硝酸鈉滴定液在攪拌條件下迅速加入，使其盡快反應(yīng)。然后將滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再緩緩滴定。尤其是在近終點(diǎn)時(shí)，因尚未反應(yīng)的芳伯氨基藥物的濃度極稀，須在最后一滴加入后，攪拌1～5分鐘，再確定終點(diǎn)是否真正到達(dá)。這樣可以縮短滴定時(shí)間，也不影響結(jié)果。

　　3.指示終點(diǎn)的方法　有電位法、永停滴定法、外指示劑法和內(nèi)指示劑法等。藥品標(biāo)準(zhǔn)中多采用永停滴定法或外指示劑法指示終點(diǎn)。

1)永停滴定法： 中國(guó)藥典規(guī)定用永停法指示亞硝酸鈉滴定法的終點(diǎn)。電極應(yīng)為鉑－鉑電極系統(tǒng)。用亞硝酸鈉液滴定，終點(diǎn)前，溶液中無(wú)亞硝酸，線路無(wú)電流通過(guò)，電流計(jì)指針指零。終點(diǎn)時(shí)溶液中有微量亞硝酸存在，電極即起氧化還原反應(yīng)，線路中遂有電流通過(guò)，此時(shí)電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點(diǎn)。

2)外指示劑法：常用碘化鉀-淀粉糊劑或指示劑，滴定到達(dá)終點(diǎn)時(shí)，稍過(guò)量的亞硝酸鈉在酸性溶液中氧化碘化鉀，析出的碘遇淀粉即顯藍(lán)色。

結(jié)合反應(yīng)歷程及課件動(dòng)畫(huà)圖片加以分析，使學(xué)生更好理解。

要使學(xué)生了解可逆電對(duì)的三種情況。

外指示劑法的不足：

①混淆終點(diǎn)。

②增加誤差。

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

(二) 非水溶液滴定法

鹽酸丁卡因和鹽酸利多卡因側(cè)鏈烴胺的叔胺氮具有弱堿性，而鹽酸布比卡因側(cè)鏈哌啶環(huán)上的叔胺氮也具有弱堿性，均可采用非水溶液滴定法測(cè)定含量。鹽酸丁卡因和鹽酸利多卡因測(cè)定時(shí)，將供試品溶解在冰醋酸中，以結(jié)晶紫為指示劑，用高氯酸液(0.1mol/L)滴定至終點(diǎn)；而鹽酸布比卡因測(cè)定時(shí)，則以萘酚苯甲醇為指示劑。由于藥物均為鹽酸鹽，用高氯酸滴定時(shí)有氫鹵酸生成，故在滴定前加入醋酸汞溶液，使成為氯化高汞，以除去氫鹵酸的干擾。

在滴定鹽酸丁卡因時(shí)，因其在冰醋酸中顯較弱的堿性，因此加入適量醋酐。因醋酐解離生成的醋酐合乙酰氧離子比醋酸合質(zhì)子的酸性還強(qiáng)，有利于丁卡因堿性的增強(qiáng)，使滴定突躍敏銳。滴定至終點(diǎn)時(shí)，溶液顯藍(lán)色。

鹽酸利多卡因測(cè)定時(shí)無(wú)需加入醋酐，滴定至終點(diǎn)時(shí)，溶液顯綠色；而鹽酸布比卡因測(cè)定時(shí)是以萘酚苯甲醇為指示劑，滴定至終點(diǎn)時(shí)，溶液亦顯綠色。

鹽酸利多卡因非水溶液滴定法反應(yīng)過(guò)程如下：

1.對(duì)乙酰氨基酚的測(cè)定　 

2.片劑溶出度測(cè)定

3.分光光度法測(cè)定人唾液中對(duì)乙�；�酚的含量

(四) 比色法

(五) 鹽酸普魯卡因胺的快速熒光測(cè)定　

(六) 高效液相色譜法

(七)體內(nèi)藥物分析

結(jié)合以往的學(xué)生試驗(yàn)，給同學(xué)簡(jiǎn)單講解試驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意的事項(xiàng)。

請(qǐng)同學(xué)記�。�

中國(guó)藥典（2005年版)測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚原料、片劑、注射液、栓劑及膠囊劑的含量方法：用百分吸收系數(shù)（)法。

問(wèn)題討論(5min)；

作業(yè)和習(xí)題布置(2min)；

歸納總結(jié)(3min)。

小 結(jié)

本節(jié)課主要講授了①芳胺類藥物的鑒別試驗(yàn)方法和含量測(cè)定的亞硝酸鈉滴定法(掌握)；②芳胺類藥物的特殊雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定的非水滴定法和分光光度法(熟悉)；③芳胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)(了解)。

復(fù)習(xí)思考題

或

作 業(yè) 題

1、三氯化鐵試劑可用于芳胺類某些藥物的區(qū)別：具三氯化鐵反應(yīng)的是 A 利多卡因；B 醋氨苯砜； C 苯佐卡因； D 對(duì)乙酰氨基酚； E 普魯卡因

2、亞硝酸鈉滴定法在本類藥物含量測(cè)定中的須注意的主要條件有哪些？

3、亞硝酸鈉滴定法在本類藥物含量測(cè)定中指示終點(diǎn)的方法？ChP（2005)亞硝酸鈉滴定法測(cè)定對(duì)氨基水楊酸鈉的含量時(shí)，指示滴定終點(diǎn)的方法為哪種

4、非水滴定法中加入醋酸汞的目的？

5、下列藥物不能采用重氮化滴定法的是A 鹽酸丁卡因 B 苯佐卡因C 貝諾酯

 D 利多卡因 E 普魯卡因

6、鹽酸異丙腎上腺素的檢查項(xiàng)目是A. 有關(guān)物質(zhì)B.二苯酮C.鹽酸D.醛E.酮體

7、以下那種藥物中應(yīng)檢查對(duì)氨基苯甲酸A. 鹽酸普魯卡因B. 鹽酸普魯卡因胺

C. 注射用鹽酸普魯卡因D. 鹽酸普魯卡因胺片E. 鹽酸普魯卡因注射液

8、芳氨類藥物有哪些鑒別方法？

9、對(duì)乙酰氨基酚特殊雜質(zhì)是什么，怎樣檢查？

10、芳氨類藥物有哪些含量測(cè)定方法？

教 學(xué) 效 果

與 分 析

多媒體教學(xué)和板書(shū)相結(jié)合，并結(jié)合一定的實(shí)例，加深學(xué)生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)和了解。特別是通過(guò)問(wèn)題討論，讓大家對(duì)所學(xué)知識(shí)進(jìn)行回顧、討論，建立一個(gè)互動(dòng)的教學(xué)氛圍。效果較好。

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

(一) 基本結(jié)構(gòu)與典型藥物

本類藥物為擬腎上腺素類藥物，共性為具有苯乙胺的基本結(jié)構(gòu)。其中腎上腺素、鹽酸異丙腎上腺素和鹽酸多巴胺分子結(jié)構(gòu)中苯環(huán)的1,2位上都有2個(gè)鄰位酚羥基，與兒茶酚類似，都屬于兒茶酚胺類藥物。本類藥物的基本結(jié)構(gòu)為：

 苯乙胺類典型藥物

講授結(jié)合多媒體教學(xué)

15min,其中結(jié)構(gòu)介紹2min，典型藥物介紹13min.

注意：

是結(jié)構(gòu)中苯環(huán)的1,2位上都有2個(gè)鄰位酚羥基，而非教材中所寫(xiě)的3,4位。此處根據(jù)典型藥物結(jié)構(gòu)向同學(xué)講解清楚

通過(guò)教學(xué)課件向同學(xué)講解并比較各典型藥物的結(jié)構(gòu)。

如：腎上腺素為：(R)-4-[2-(甲氨基)-1-羥基乙基]-1,2-苯二酚；

鹽酸去氧腎上腺素為：

(R)-4-(2- 氨基-1- 羥基乙基 )-1，2-苯二酚重酒石酸鹽一水合物

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

　  1.弱堿性　烴氨基側(cè)鏈，其氮為仲胺氮，顯弱堿性。其游離堿難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，其鹽可溶于水。

2.酚羥基特性　可與重金屬離子絡(luò)合呈色，露置空氣中或遇光、熱易氧化，色漸變深，在堿性溶液中更易變色。　

3.光學(xué)活性　多數(shù)藥物分子結(jié)構(gòu)中具有手性碳原子，具有旋光性，可供分析用。

二、鑒別試驗(yàn)

(一) 與三氯化鐵反應(yīng)---酚羥基

腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素等藥物的分子結(jié)構(gòu)中具有酚羥基，與Fe³⁺ 離子絡(luò)合顯色，加入堿性溶液，隨即被高鐵離子氧化而顯紫色或紫紅色。

 (二) 與甲醛－硫酸反應(yīng)

腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素等藥物可與甲醛在硫酸中反應(yīng)，形成具有醌式結(jié)構(gòu)的有色化合物。

藥典未采用此法，(略)

(三) 氧化反應(yīng)---酚羥基

(四) 紫外特征吸收與紅外吸收光譜

(五) 與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)（Rimini試驗(yàn))

重酒石酸間羥胺分子中具有脂肪伯氨基，加水溶解后，加亞硝基鐵氰化鈉試液、丙酮數(shù)滴與碳酸氫鈉少量，加熱后即顯紅紫色。此為有脂肪族伯胺的專屬反應(yīng)。

試驗(yàn)中所用的丙酮必須不含甲醛。

(六)雙縮脲反應(yīng)

鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿分子結(jié)構(gòu)中，芳環(huán)側(cè)鏈具有氨基醇結(jié)構(gòu)，可顯雙縮脲反應(yīng)。如鹽酸麻黃堿的鑒別[中國(guó)藥典(2005)]：

【鑒別】  (1) 取本品約10mg，加水1ml 溶解后，加硫酸銅試液2 滴與20％氫氧化鈉溶液1ml ，即顯藍(lán)紫色；加乙醚1ml ，振搖后，放置，乙醚層即顯紫紅色，水層變成藍(lán)色。

(一) 酮體檢查

在生產(chǎn)中由酮體氫化還原制得的藥物，若氫化不完全，易引入酮體雜質(zhì)，所以藥典規(guī)定檢查酮體。如腎上腺素、重酒石酸去甲腎上腺素、鹽酸去氧腎上腺素、鹽酸異丙腎上腺素和鹽酸甲氧明等。

如：鹽酸甲氧明：【檢查】  酮胺  取本品，加水制成每1ml 中含1.5mg 的溶液，照分光光度法（附錄Ⅳ A)，在347nm 的波長(zhǎng)處測(cè)定，吸收度不得過(guò)0.06。

(二) 有關(guān)物質(zhì)檢查

采用薄層色譜法，如沙丁胺醇的檢查：

8min

舉例介紹

化學(xué)性質(zhì)是下面所進(jìn)行的鑒別、檢查和含量測(cè)定的依據(jù)。

15min，結(jié)合藥典、教學(xué)課件講解

如中國(guó)藥典(2005)：

腎上腺素、重酒石酸去甲腎上腺素、鹽酸去氧腎上腺素的鑒別

結(jié)合藥典、教學(xué)課件講解。

如中國(guó)藥典(2005年版)中重酒石酸去甲腎上腺素的鑒別

雙縮脲：

在堿性溶液中，雙縮 

脲能與Cu²⁺作用，形成紫色或紫紅色絡(luò)合物，這個(gè)反應(yīng)叫雙縮脲反應(yīng)。

雙縮脲試劑：0.1g/ml NaOH和0.01g/ml的CuSO4。

12min，酮體的來(lái)源和檢查方法

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

(三) 鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)雙胍的檢查

有關(guān)雙胍  取本品1.00g ，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，照紙色譜法（附錄Ⅴ A)試驗(yàn)，精密吸取上述溶液0.2ml ，分別點(diǎn)于兩張色譜濾紙條(7.5cm×50cm) 上，并以甲醇作空白點(diǎn)于另一色譜濾紙條，樣點(diǎn)直徑均為0.5 ～1m.bhskgw.cncm ；照下行法，將上述色譜濾紙條同置展開(kāi)室內(nèi)，以醋酸乙酯－乙醇－水(6:3:1) 為展開(kāi)劑，展開(kāi)至前沿距下端約7cm 處，取出，晾干，用顯色劑（取10％鐵氰化鉀溶液1ml ，加10％亞硝基鐵氰化鈉溶液與10％氫氧化鈉溶液各1ml ，搖勻，放置15分鐘，加水10ml與丙酮12ml，混勻)噴其中一張點(diǎn)樣紙條（有關(guān)雙胍顯紅色帶，Rf值約為0.1 )，參照此色譜帶，在另一張點(diǎn)樣及空白紙條上，剪取其相應(yīng)部分并向外延伸1cm ，并分剪成碎條，精密吸取甲醇各20ml分別進(jìn)行萃取后，照分光光度法（附錄Ⅳ A)，在232nm 的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，不得過(guò)0.48。   

四、含量測(cè)定

本類藥物的原料多采用非水溶液滴定法和溴量法測(cè)定含量，其制劑的測(cè)定方法較多，有提取容量法、陰離子表面活性劑滴定法、比色法、紫外分光光度法和高效液相色譜法等。　

(一) 非水溶液滴定法

在列舉的14型藥物中，有11藥物的原料藥均采用非水溶液滴定法測(cè)定含量。常用的測(cè)定條件為：冰醋酸為溶劑，加入醋酸汞試液以消除氫鹵酸的干擾，并用結(jié)晶紫指示液指示終點(diǎn)。僅鹽酸甲氧明測(cè)定中以萘酚苯甲醇指示終點(diǎn)；鹽酸苯乙雙胍和鹽酸克侖特羅的測(cè)定采用電位滴定法。如堿性較弱，終點(diǎn)不明顯可加入醋酐，提高其堿性，使終點(diǎn)突躍明顯。其測(cè)定的主要條件詳見(jiàn)表 7－7。

1.重酒石酸去甲腎上腺素的測(cè)定　取本品0.2g，精密稱定，加冰醋酸10ml，振搖溶解后(必要時(shí)微溫)，加結(jié)晶紫指示劑1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L)滴定，至溶液顯藍(lán)綠色，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的高氯酸滴定液（0.1mol/L)相當(dāng)于31.93mg的C₈H₁₁NO₃.C₄H₄O₆。

由于重酒石酸在冰醋酸溶液中酸性較弱，不干擾高氯酸的滴定和結(jié)晶紫指示劑終點(diǎn)顏色的變化。故可以高氯酸直接滴定。

2.鹽酸克侖特羅的測(cè)定　取本品約0.25g，精密稱定，加冰醋酸20ml，微熱使溶解，放冷，加醋酸汞試液5ml，照電位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L)滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于31.37mg的C₁₂H₁₈C_l2N₂O·HCl。

注意展開(kāi)劑的蒸氣飽和程度對(duì)樣品色譜行為的影響，尤其在使用混合溶劑時(shí)更為突出。

此處為紙色譜法的實(shí)例。

30min

結(jié)晶紫：

可由堿式色(紫色)變至藍(lán)紫、藍(lán)、藍(lán)綠、綠、黃綠，最后轉(zhuǎn)變?yōu)樗崾缴?黃色)。

萘酚苯甲醇:

堿式色：黃色

酸式色：綠色

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

*醋酸汞的作用--消除氫鹵酸的干擾。

*為何用電位法指示終點(diǎn)？---由于鹽酸克侖特羅的游離堿堿性較弱，終點(diǎn)突躍不明顯。

3.硫酸沙丁胺醇的測(cè)定　取本品約0.4g，精密稱定，加冰醋酸10ml，微熱使溶解，放冷，加醋酐15ml和結(jié)晶紫指示液1滴用高氯酸滴定液（0.1mol/L)滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的高氯酸滴定液（0.1mol/L)相當(dāng)于57.67mg的（C₁₃H₂₁NO₃)₂ H₂SO₄ 。

有機(jī)堿的硫酸鹽，因硫酸在滴定液中酸性很強(qiáng)，只能滴定至HSO₄^-。

  *為何在放冷的條件下加醋酐？

---防止氨基被乙�；�，乙�；�物堿性很弱，如為伯氨基的乙酰化物，以結(jié)晶紫為指示劑時(shí)不能被滴定，用電位滴定法尚可測(cè)定，但突躍很小，這樣就會(huì)使滴定結(jié)果偏低。仲氨基的乙�；�物，以指示劑法和電位滴定法都不能被滴定。但在低溫時(shí)可防止乙�；�，所以加冰醋酸溶解樣品后，應(yīng)在放冷的條件下再加醋酐。

 (二) 溴量法

重酒石酸間羥胺、鹽酸去氧腎上腺素及其注射液均采用溴量法測(cè)定含量。其測(cè)定原理系藥物分子中的苯酚結(jié)構(gòu)，在酸性溶液中酚羥基的鄰、對(duì)位活潑氫能與量的溴定量地發(fā)生溴代反應(yīng)，再以碘量法測(cè)定剩余的溴，根據(jù)消耗的硫代硫酸鈉滴定液的量，即可計(jì)算供試品的含量。如鹽酸去氧腎上腺素：

請(qǐng)同學(xué)思考并回答：

(1) 醋酸汞的作用？

(2) 為何用電位法指示終點(diǎn)？

請(qǐng)同學(xué)討論：

為何在放冷的條件下加醋酐？

碘量法一般常用三種：直接碘量法；剩余碘量法；置換碘量法。此處為置換碘量法。

溴液：

溴酸鉀+溴化鉀的混合溶液

至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，為什么？

基本內(nèi)容

注解（進(jìn)展、輔助

手段和時(shí)間分配)

【含量測(cè)定】  取本品約0.1g，精密稱定，置碘瓶中，加水20ml使溶解，精密加溴液(0.1mol/L)50ml，再加鹽酸5ml,立即密塞，放置15分鐘并時(shí)時(shí)振搖，注意微開(kāi)瓶塞，加碘化鉀試液10ml ，立即密塞，振搖后，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml溴滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于3.395mg 的C₉H₁₃NO₂.HCl。

(三) 比色法

(四) 提取酸堿滴定法

本法是根據(jù)本類藥物的鹽酸鹽或硫酸鹽可溶于水，而藥物本身為游離堿不溶于水，可以溶于有機(jī)溶劑的一般通性進(jìn)行的。常用的測(cè)定方法是將供試品溶于水或礦酸溶液中，加入適量的堿性試劑使藥物游離后，用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑提取。然后將提取液蒸干，殘?jiān)�中加中性乙醇溶解，用�?biāo)準(zhǔn)酸滴定液直接滴定；或在提取液中加過(guò)量的標(biāo)準(zhǔn)酸滴定液，蒸去有機(jī)溶劑后，再用標(biāo)準(zhǔn)堿滴定液回滴定。

如硫酸苯丙胺的含量測(cè)定：

(五) 腎上腺素的熒光分光光度法

(六) 高效液相色譜法

第三節(jié)　芳氧丙醇胺類藥物

一、藥物結(jié)構(gòu)與主要理化性質(zhì)

二、鑒別試驗(yàn)

三、鹽酸卡替洛爾中有關(guān)物質(zhì)的檢查

本品中有關(guān)物質(zhì)的檢查，采用薄層色譜法的高低濃度對(duì)比法進(jìn)行。

檢查方法：

根據(jù)操作，對(duì)照溶液是由供試品稀釋500倍制備而成，則對(duì)照溶液的濃度是供試品溶液濃度的0.2%�？梢�(jiàn)，鹽酸卡替洛爾中有關(guān)物質(zhì)的限量應(yīng)控制在0.2%以內(nèi)。

四、含量測(cè)定

(一)鹽酸卡替洛爾原料藥含量測(cè)定方法

 (二)鹽酸卡替洛爾滴眼液含量測(cè)定方法

 (三)體內(nèi)藥物分析

10min,請(qǐng)同學(xué)注意：此處與教材有出入：

鹽酸卡替洛爾中有關(guān)物質(zhì)的限量應(yīng)控制在0.2%以內(nèi)。

問(wèn)題討論(5min)；

作業(yè)和習(xí)題布置(2min)；

歸納總結(jié)(3min)。

小 結(jié)

本次課主要講授了苯乙胺類藥物的結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)、鑒別試驗(yàn)、特殊雜質(zhì)檢查及含量測(cè)定方法。  

復(fù)習(xí)思考題

或

作 業(yè) 題

1、三氯化鐵試劑可用于芳胺類某些藥物的區(qū)別：具三氯化鐵反應(yīng)的是 A 利多卡因；B 醋氨苯砜； C 苯佐卡因； D 對(duì)乙酰氨基酚； E 普魯卡因

2、亞硝酸鈉滴定法在本類藥物含量測(cè)定中的須注意的主要條件有哪些？

3、亞硝酸鈉滴定法在本類藥物含量測(cè)定中指示終點(diǎn)的方法？ChP（2005)亞硝酸鈉滴定法測(cè)定對(duì)氨基水楊酸鈉的含量時(shí)，指示滴定終點(diǎn)的方法為哪種

4、非水滴定法中加入醋酸汞的目的？

5、下列藥物不能采用重氮化滴定法的是A 鹽酸丁卡因 B 苯佐卡因C 貝諾酯

 D 利多卡因 E 普魯卡因

6、鹽酸異丙腎上腺素的檢查項(xiàng)目是A. 有關(guān)物質(zhì)B.二苯酮C.鹽酸D.醛E.酮體

7、以下那種藥物中應(yīng)檢查對(duì)氨基苯甲酸A. 鹽酸普魯卡因B. 鹽酸普魯卡因胺

C. 注射用鹽酸普魯卡因D. 鹽酸普魯卡因胺片E. 鹽酸普魯卡因注射液

教 學(xué) 效 果

與 分 析

多媒體教學(xué)和板書(shū)相結(jié)合，并結(jié)合一定的實(shí)例，加深學(xué)生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)和了解。特別是通過(guò)問(wèn)題討論，讓大家對(duì)所學(xué)知識(shí)進(jìn)行回顧、討論，建立一個(gè)互動(dòng)的教學(xué)氛圍，使同學(xué)們掌握本次課的教學(xué)內(nèi)容。效果較好。