心血管活動的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)
目的和原理 支配心臟的傳出神經(jīng)主要為心交感神經(jīng)和心迷走神經(jīng)，心交感神經(jīng)興奮可致心率加快，房室交界的傳導(dǎo)加快，心房肌和心室肌的收縮能力加強，而心迷走神經(jīng)興奮可致心率減慢，心房肌收縮能力減弱，房室傳導(dǎo)速度減慢。絕大多數(shù)血管平滑肌受自主神經(jīng)支配，主要是交感縮血管神經(jīng)纖維，興奮時使血管收縮，外周阻力增加，同時由于容量血管收縮，靜脈回流增加，心輸血量亦增加。神經(jīng)系統(tǒng)通過心血管反射(如壓力感受性反射等)調(diào)節(jié)心血管的活動，改變心輸出量和外周阻力，從而調(diào)節(jié)動脈血壓。
心血管活動除受神經(jīng)調(diào)節(jié)外，還受體液因素的調(diào)節(jié)，其中最主要的為腎上腺素和去甲腎上腺素。腎上腺素可與α和β兩類腎上腺素能受體結(jié)合，使心率加快，收縮力加強，傳導(dǎo)加快，心輸出量增加。其對血管的作用取決于血管平滑肌上兩類受體分布的情況。去甲腎上腺素主要激活α受體，使血管收縮，外周阻力增加，動脈血壓升高，其對心臟作用遠較腎上腺素為弱。
本實驗通過動脈血壓的變化來反映心血管活動變化，目的在于觀察心血管活動的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)和學(xué)習(xí)哺乳類動物動脈血壓的直接測量方法。
實驗對象 家兔
實驗器材和藥品 MS-302微機系統(tǒng)，血壓換能器，保護電極，兔手術(shù)臺，哺乳動物手術(shù)器械一套，照明燈，鐵支柱，雙凹夾，動脈夾，三通管，塑料動脈插管，注射器(1毫升，5毫升，20毫升)，黑線，白線，紗布，棉花，1%戊巴比妥鈉，1∶1000肝素，1∶10000去甲腎上腺素，12.5單位/毫升肝素生理鹽水，生理鹽水。
實驗步驟
一、手術(shù)準(zhǔn)備
(一)麻醉并固定動物：用1%戊巴比妥鈉按3.0～3.5ml/kg的劑量由耳緣靜脈緩慢注入。動物麻醉后，仰臥固定于手術(shù)臺上。
(二)分離頸部神經(jīng)和血管：在氣管右側(cè)辨別并分離減壓神經(jīng)和迷走神經(jīng)，減壓神經(jīng)最細，常與交感神經(jīng)緊貼在一起。分別在各神經(jīng)下方穿以不同顏色的絲線備用。分離時特別注意不要過度牽拉，并隨時用生理鹽水濕潤，分離左側(cè)頸總動脈在其下方穿兩條線備用。
(三)插動脈插管和氣管插管：靜脈注入1000單位/公斤肝素以抗凝。在左側(cè)頸總動脈插入已充滿肝素生理鹽水的動脈插管，用備好的結(jié)扎線固定。插好氣管插管，保持呼吸通暢。
（基本操作步驟見后附錄)
二、實驗紀(jì)錄裝置
（一)、將壓力換能器插頭連到MS-302微機系統(tǒng)相應(yīng)通道的插座（例如2通道記錄時插入插座2)壓力腔內(nèi)充滿液體，排除氣泡經(jīng)三通與動脈插管相連。
（二)、開機后自動啟動MS-302系統(tǒng)。
（三)、選定“信號輸入”為“壓力”并自動調(diào)零，調(diào)零時應(yīng)將左側(cè)頸總動脈上的動脈夾保持加閉，并將壓力換能器上的另一塑料導(dǎo)管的血管鉗打開，使換能器的壓力腔與大氣相通，從而使輸入為零。調(diào)零完畢后，用血管鉗夾閉該塑料管，再將頸總動脈上的動脈夾放開，此時，動脈血壓的變化就能通過壓力換能器轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘栞斎胛C，并在微機的顯示器上的相應(yīng)通道顯示出壓力曲線。
（四)、根據(jù)換能器的靈敏度設(shè)定該通道的“增益選擇”，一般設(shè)為8或4mv/cm檔。
（五)、走紙速度設(shè)定“顯速選擇”，調(diào)整掃描速度，一般可采用25mm/s或10mm/s。
（六)、如果血壓曲線沒有顯示在所選通道的正中位置，則選中“參數(shù)設(shè)置”，按“回車鍵”后選中“基線位移”，按“回車鍵”，選中相應(yīng)通道后按“回車鍵”，用上下左右光標(biāo)移動鍵調(diào)整血壓曲線于該通道的正中位置。
（七)、調(diào)整“參數(shù)設(shè)置”中的“橫向壓縮”為1:5左右，使血壓的二級波能清楚的顯示出來。
（八)、選擇“參數(shù)設(shè)置”中的“顯示方式”，設(shè)置為“連續(xù)示波顯示”。
（九)、待血壓穩(wěn)定后即可開始正常記錄，按“Esc鍵”選“記錄狀態(tài)”，然后按“回車鍵”。選擇“自己命名”，再按“回車鍵”，輸入自己想好的一個文件名，按“回車鍵”，即可開始記錄。記錄中按“F2鍵”作必要的標(biāo)記。
三、觀察項目
（一)、正常血壓曲線：觀察血壓的一級波和二級波，有時可見三級波。觀察完畢后應(yīng)打上標(biāo)記，方法如下：按“F2鍵”，選擇所用的通道，按上下光標(biāo)鍵翻頁，左右光標(biāo)鍵選擇所需的文字標(biāo)記，如果標(biāo)記內(nèi)容中無所需文字標(biāo)記，則按“Esc鍵”打上數(shù)字標(biāo)記（微機會自動按順序排列數(shù)碼)，并記住該數(shù)字標(biāo)記m.bhskgw.cn/kuaiji/實際代表的文字內(nèi)容。
（二)、夾閉頸總動脈：用動脈夾夾閉右側(cè)頸總動脈15秒，觀察血壓的變化，夾閉之前先按“F2鍵”，選擇所用通道后按回車鍵，選擇所需的文字標(biāo)記，例如此時應(yīng)選中“夾閉頸總動脈”，并在夾閉動脈的同時按“回車鍵”打上標(biāo)記（以后打標(biāo)記過程與此相同)。
(三)、電刺激減壓神經(jīng)：刺激之前先“設(shè)刺激器”，將“刺激方式”設(shè)為“連續(xù)刺激”，強度設(shè)為1v或1.5v，按“F5”給予刺激輸出。將完整的減壓神經(jīng)搭在電極上刺激約15~20秒，并同時打上標(biāo)記，觀察血壓的變化。再在神經(jīng)中部做雙結(jié)扎，在雙結(jié)扎之間剪斷神經(jīng)，分別刺激其中樞端與外周端，觀察血壓變化，并在刺激同時打上標(biāo)記。
（四)、電刺激迷走神經(jīng)：結(jié)扎迷走神經(jīng)，剪斷其中樞端，電刺激其外周端，同時打上標(biāo)記，并觀察血壓變化。
（五)、靜脈注射去甲腎上腺素：由耳緣靜脈注入1：10000的去甲腎上腺素0.3ml，同時打標(biāo)記并觀察血壓變化。
（六)、放血、補液：從右側(cè)頸總動脈插入放血管，將血放入燒杯中，并同時打標(biāo)記，當(dāng)動脈血壓降至50mmHg左右時，迅速補充37oC生理鹽水，同時打標(biāo)記，并觀察血壓變化。
（七)、結(jié)束實驗：按“Esc鍵”進入“監(jiān)視狀態(tài)”。
編輯、打印
一、實驗結(jié)束后，進入“重顯資料”狀態(tài)，選擇本次所做實驗的文件名，按“回車鍵”，進入重顯界面，則剛才所做實驗圖形可重新顯示。
二、按“F4鍵”可進行重顯狀態(tài)下的“重顯速度”和“橫向壓縮”的調(diào)整，“重顯速度”選4或5級，“橫向壓縮醫(yī)學(xué)全.在線m.bhskgw.cn”選1:4或1:5。
三、選“標(biāo)記顯示”，按上下左右光標(biāo)移動鍵可逐個顯示所打標(biāo)記，以便剪輯。先顯示第一個標(biāo)記，當(dāng)所需圖形顯示出來后，按空格鍵使走“紙”暫停，使圖形停在一個合適的位置。
（四)、按“F7鍵”，出現(xiàn)一條剪輯線，按上下左右光標(biāo)移動鍵（上下鍵為粗調(diào)，左右鍵為微調(diào))將剪輯線移到所要選圖形的開始位置，按“回車鍵”，確認(rèn)起點；同樣，按“F8”將另一剪輯線移到所要選圖形的終止位置，按“回車鍵”，確認(rèn)終點。即可剪輯下第一個標(biāo)記處的有價值的圖形。用同樣的方法剪輯其他標(biāo)記的有價值的圖形。所有剪輯過的圖形形成一個文件：“R-文件名”。
（五)、剪輯完畢后，按“Esc鍵”進入“監(jiān)視狀態(tài)”。
（六)、打印
1．在打印之前，首先進行屏幕顏色和圖形顏色的設(shè)置，將所要打印的圖形顏色設(shè)置為黃色或白色，將背景顏色設(shè)為藍色或黑色，才能被打印出來。設(shè)置方法如下：選擇“參數(shù)設(shè)置”，按“回車鍵”；選擇“屏幕顏色”，可分別選擇“1通道圖形”、“2通道圖形”、“3通道圖形”、“背景顏色”、“方格背景”的子菜單，選擇其中一項后，在子菜單后部顯示一個色塊，可用左右光標(biāo)鍵選擇所需色調(diào)，該項顯示即改變?yōu)樗x顏色，按“回車鍵”確認(rèn)并退出。按同樣的方法可改變其他通道的顏色和背景顏色。
2．選擇“打印選擇”，按“回車鍵”，子菜單區(qū)顯示“1通道圖形”、“2通道圖形”、“3通道圖形”、“數(shù)據(jù)打印”四項內(nèi)容，可以反復(fù)按“回車鍵”來選擇打印或不打印，選取后按“Esc鍵”退出。
3．進入“重顯資料”，選擇“R-文件名”，按“回車鍵”，待圖形出現(xiàn)后，按“空格鍵”，屏幕凍結(jié)。打印機進紙聯(lián)機后，按“F9鍵”即可打印。如一屏顯示不完，可反復(fù)使用“空格鍵”，分屏打印，最終打印出全部實驗數(shù)據(jù)圖形。
課堂討論
1．正常血壓的一級波、二級波及三級波各有何特征？其形成機制何在？
2．夾閉一側(cè)頸總動脈后血壓發(fā)生什么變化？試述其機制。
3．刺激完整的減壓神經(jīng)及其中樞端和外周端，血壓各有何種變化？為什么？
4．為何預(yù)先切斷迷走神經(jīng)，再刺激其外周端？
5．去甲腎上腺素和腎上腺素對心血管的作用有何不同？
附錄
家兔頸部神經(jīng)分離、動脈插管及氣管插管。
(一)麻醉并固定動物 用1%戊巴比妥鈉3.0～3.5ml/kg的劑量從耳緣靜脈注入。待動物麻醉后，背位固定于手術(shù)臺上。
(二)分離頸部神經(jīng)和血管 剪去頸前部的毛，沿正中線作一個5～7厘米的皮膚切口。分離皮下組織和肌肉，暴露氣管。于氣管兩側(cè)找到頸總動脈、迷走神經(jīng)、頸交感神經(jīng)和減壓神經(jīng)。首先仔細識別并分離三條神經(jīng)，其中迷走神經(jīng)最粗，交感神經(jīng)其次，減壓神經(jīng)最細，常與交感神經(jīng)緊貼在一起。在減壓神經(jīng)及迷走神經(jīng)下分別穿不同色的線備用。分離時切注意不要過度牽拉，并隨時用生理鹽水濕潤。然后分離頸動脈，下穿兩條線備用。
(三)插動脈插管 靜脈注入1000單位/公斤肝素以抗血凝。在左側(cè)頸總動脈的近心端夾一動脈夾阻斷血流，并在動脈遠心端距動脈夾約3厘米處結(jié)扎。 用小剪刀在結(jié)扎線的近心側(cè)剪一以45°角斜向近心端的小口，向心臟方向插入動脈插管，用備好的線結(jié)扎固定。
(四)插氣管插管 在氣管下穿線，于甲狀軟骨下1～2個環(huán)狀軟骨間用粗剪刀剪開氣管的一半，并向下方作一縱切口，使切口呈倒“T”形。插入氣管插管，并用備好的線固定。(圖1)
圖1 氣管切開術(shù)和氣管插管法
注意事項
1.操作切忌粗暴，隨時用生理溶液濕潤組織以保持活性。
2.忌用金屬器械觸及、夾捏神經(jīng)。
課堂討論
1.如何判斷麻醉效果的深度?
2.動脈麻醉過程中常會出現(xiàn)什么問題? 應(yīng)如何處理?
3.處死動物的方法有哪些?
4.如何分離神經(jīng)、血管? 注意事項有哪些?
