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醫(yī)學(xué)論文范文:蜂膠黃酮對D半乳糖致衰老小鼠腦蛋白質(zhì)、核酸代謝的影響
【摘要】 目的 探討蜂膠黃酮對衰老模型小鼠學(xué)習(xí)記憶行為的影響及其作用機制。方法 采用同位素標記物體內(nèi)摻入法觀察蜂膠黃酮各組小鼠腦蛋白質(zhì)及核酸代謝的變化。結(jié)果 蜂膠黃酮增加小鼠腦組織蛋白質(zhì)、DNA和RNA含量。結(jié)論 蜂膠黃酮能明顯增強小鼠學(xué)習(xí)記憶功能，其作用機制與其促進的蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子形成密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】 蜂膠黃酮 學(xué)習(xí)記憶能力 蛋白質(zhì) 核酸代謝
近年來研究發(fā)現(xiàn)蜂膠具有明顯的抗癌、調(diào)節(jié)血糖、增強機體免疫功能、抗菌、抑制病毒等效應(yīng)〔1〕，并可提高小鼠肝臟過氧化氫酶與超氧化物歧化酶的活性〔2〕。為進一步探討蜂膠黃酮抗衰老作用機制,本研究通過同位素標記物摻入法觀察蜂膠黃酮對衰老模型小鼠腦蛋白質(zhì)及核酸代謝的影響，為蜂膠黃酮抗衰老的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 藥物及試劑
蜂膠黃酮由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)生化教研室提純，并經(jīng)黑龍江省中藥研究所鑒定，稀釋成黃酮含量為15 mg/ml使用。D半乳糖購于Sigma公司。3H胸腺嘧啶核苷（3HTdR)、3H尿嘧啶核苷（3HUR)和3H亮氨酸（3HLeu)均購于中國科學(xué)院上海原子核研究所。PPO（2、5二苯基惡唑)、POPOP（1，4雙〔5苯基惡唑基2〕苯)為上�；瘜W(xué)試劑一廠產(chǎn)品，閃爍純。三氯醋酸、無水乙醇、乙醚、甲酸、二氧六環(huán)、萘均為分析純。
1.2 儀器
液體閃爍計數(shù)儀，Beckman公司；D37520型高速冷凍離心機,德國HERAEUS公司；JY98Ⅲ型超聲波細胞粉碎機,寧波科生儀器廠；跳臺裝置為蚌埠醫(yī)學(xué)院無線電二廠醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站m.bhskgw.cn。
1.3 方法
1.3.1 分組
昆明種健康小鼠，體重(25±2) g，雌雄各半，小白鼠常規(guī)喂養(yǎng)6 d，隨機分為空白對照組、D半乳糖衰老模型和蜂膠黃酮組，每組10只，實驗小鼠均由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。除空白對照組外, 衰老模型組和蜂膠黃酮組每天用D半乳糖150 mg/kg頸背部皮下注射連續(xù)30 d，空白對照組皮下注射等劑量生理鹽水,自由進食進水；造模同時蜂膠黃酮組灌胃蜂膠黃酮300 mg/kg，空白對照組及衰老模型組灌服等量生理鹽水，每天1次，連續(xù)給藥30 d。衰老模型組連續(xù)給D半乳糖30 d后,小鼠行動遲緩,毛色灰暗,形體瘦弱,呈明顯的衰老體征,證明衰老模型成功建立〔3〕。
1.3.2 蜂膠黃酮對3HLeu摻入小鼠腦組織蛋白質(zhì)影響〔4〕
按照上述方法連續(xù)給藥30 d。實驗前12 h禁食，各組腹腔注射3HLeu 1.48×105 bq(4 μci)/10 g,4 h后斷髓處死小鼠，迅速取出腦組織，用濾紙吸去血液，剪碎，用生理鹽水制成50 mg/ml的組織勻漿。取0.5 ml組織勻漿置于10 ml試管中，加入10%三氯醋酸2 ml，沉淀離心，3 500 r/min，10 min，棄去上清液，將沉淀用5%三氯醋酸和1∶1醇醚混合物再各洗1次，棄去上清，向沉淀中加88%甲酸0.5 ml，置于90℃水浴中消化20 min，取0.1 ml消化液加入含4 ml閃爍液（PPO 3.0 g、POPOP 0.5 g、萘60 g，加二氧六環(huán)至500 ml，避光保存)的閃爍杯中，次日用液體閃爍計數(shù)儀測定樣品放射性。
