炔雌醇的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定炔雌醇的含量。

本方法適用炔雌醇。

供試品制成無水乙醇溶液，加入內(nèi)標溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長281nm處檢測炔雌醇（C₂₀H₂₄O₂)和內(nèi)標醋酸甲地孕酮的吸收值，計算出其含量。

1.甲醇

2.水

3.無水乙醇

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按炔雌醇峰計算應不低于 1000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇＋水= 70＋30

2.2 檢測波長：281nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

稱取本品40mg，精密稱定。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取炔雌醇對照品適量，以無水乙醇溶解，即得對照品溶液。

3. 內(nèi)標溶液的制備

取醋酸甲地孕酮20mg，精密稱定，置10mL量瓶中，以無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

4. 供試品溶液的制備

將供試品置于5mL量瓶中，以無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述供試品溶液與內(nèi)標溶液2mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，取10μL 注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，用紫外吸收檢測器，于波長240nm處測定炔雌醇和內(nèi)標的吸收值，按內(nèi)標法以峰面積計算，即得。另取炔雌醇對照品溶液，同法測定。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p359。