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維生素B6的測(cè)定—高效液相色譜法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫(kù)中心 藥學(xué)論壇 維生素B6的測(cè)定—高效液相色譜法
方法名稱:
維生素B6的測(cè)定—高效液相色譜法
應(yīng)用范圍:

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定維生素B6(C8H11NO3)的含量。

本方法適用于維生素B6。

方法原理:

供試品制成流動(dòng)相溶液,進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)291nm處檢測(cè)維生素B6吸收值,計(jì)算出其含量。

試劑:

1. 甲醇

2. 0.04%戊烷磺酸鈉溶液(用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至3.0)

3. 冰醋酸

儀器設(shè)備:

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按維生素B6峰計(jì)算不低于4000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相:0.04%戊烷磺酸鈉溶液 甲醇=85 15。

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng):291nm

2.3 柱溫:室溫

試樣制備:

1. 稱取供試品

精密稱取本品適量。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取維生素B6對(duì)照品適量,同供試品配制,搖勻,即得。

3. 供試品溶液的制備

將供試品加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1mL含有約0.1mg的溶液,搖勻,即得。

注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟:

分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)291nm處測(cè)定維生素B6的吸收值,計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn):

中華人民共和國(guó)藥典,國(guó)家藥典委員會(huì)編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,二部,p.668。

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