方法名稱： |
靈芝子珍珠口服液—腺苷的測定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測定靈芝子珍珠口服液中腺苷的含量。 本方法適用于靈芝子珍珠口服液。 |
方法原理： |
取供試品加甲醇，超聲處理，放置待沉淀完全，濾過，取許濾液蒸干，殘渣加水溶解，以水飽和的正丁醇提取，正丁醇提取液蒸干，殘渣加50%甲醇溶解并定容，搖勻，作為供試品溶液。注入高效液相色譜儀，以紫外檢測器檢測，檢測波長為260nm，記錄腺苷的響應(yīng)值，計算其含量。 |
試劑： |
1. 甲醇 2. 正丁醇 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 Hypersil C18 (250 ×4.6mm, 5μm)。 1.3紫外檢測器 2 色譜條件 2.1 流動相： 甲醇 磷酸鹽緩沖液（pH 6.5) = 10 1 2.3 柱溫：30℃ 2.4 檢測波長：260nm 2.5 流速：1.0mL/min |
試樣制備： |
1. 對照品溶液的制備 精密稱取腺苷對照品適量，加甲醇配制成1mL含40μg的對照品溶液。 2. 供試品溶液的制備 取供試品20mL置100mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻超聲處理5分鐘，放置待沉淀完全，濾過，取許濾液50mL蒸干，殘渣加水20mL溶解，以水飽和的正丁醇提取4次，合并正丁醇提取液蒸干，殘渣加50%甲醇溶解并定容至5mL，搖勻，作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1. 標準曲線的繪制 精密吸取上述對照品溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μL注入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外檢測器檢測器，于260nm檢測腺苷的吸收值，以腺苷的進樣量對其峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測定 精密吸取上述供試品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，以紫外檢測器檢測，檢測波長為260nm，記錄腺苷的響應(yīng)值，計算其含量。 |
參考文獻： |
徐麗華，靳春榮，莊明蕊. HPLC法測定靈芝子珍珠口服液中腺苷的含量. 中國藥品標準，2003，4（2)：94-96. |
