廣防風(fēng)顆�！獜V防風(fēng)苷A測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定廣防風(fēng)苷A的含量

本方法適用于廣防風(fēng)(Epimeredi indica(L.) Rothmalex)根單味中藥制成的顆粒。

采用高效液相色譜外標(biāo)法測定廣防風(fēng)顆粒中的廣防風(fēng)苷A含量。

1. 乙腈為色譜純；

2. 甲醇

3. 廣防風(fēng)苷A對照品（自制)

1 儀器

1.1 液相色譜儀

1.2 紫外檢測器

1.3 色譜柱Discovery C₁₈色譜柱(250mm×4.6mm)

1.4. 電子分析天平

2 試驗(yàn)條件

2.1流動相∶乙腈＋水=27＋73

2.2 流速：1.0ml·min^-1，

2.3 檢測波長：320nm

2.4 柱溫：室溫

2.5 系統(tǒng)適應(yīng)性： 理論塔板數(shù)以廣防風(fēng)苷A峰計算應(yīng)不低于2000；分離度均大于1.5。

1.照品溶液的制備

精密稱取廣防風(fēng)苷A對照品(80℃干燥至恒重)5mg，加甲醇超聲溶解，定容至25mL，作為對照品溶液。精密吸取對照液各0.4，0.8，1.2mL，1.6，2.0mL，分別用甲醇定容至2mL，搖勻，得濃度分別為39.6，79.2，118.8， 158.4，198μg·mL^-1的廣防風(fēng)苷A標(biāo)準(zhǔn)液。

2.供試品溶液的制備

精密稱取廣防風(fēng)顆粒1.17g，加水超聲溶解，定容至10mL，取溶液于13000r·min^-1下離心10min，上清液作為供試樣品溶液。

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

在上述色譜條件下，各進(jìn)樣20μL。以峰面積(y)為縱坐標(biāo)，廣防風(fēng)苷A的濃度(x)為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，計算回歸方程Y=20.139X- 154.35；r=0.9994；)，線性范圍：0.792～3.960μg。

2.樣品測定

取供試品溶液適量，注入液相色譜儀，測定峰面積，外標(biāo)法計算含量。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。