保赤散—朱砂含量測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定保赤散中朱砂的含量。

本方法適用于保赤散等含朱砂的散劑。

供試品消化后,以二乙基二硫代氨基甲酸鈉(ＤＥＤＴＣ)為配合劑,再用ＨＰＬＣ對(duì)ＨｇＤＥＤＴＣ的配合物用高效液相色譜儀進(jìn)行分離，紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)270nm處測(cè)定吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2.水（重蒸餾水)

3. 硝酸、高氯酸、丙酮、氯化汞、ＤＥＤＴＣ(ＡＣＲＯＳ,ＵＳＡ)均為分析純

4. Ｈｇ ＤＥＤＴＣ配合物(自制)

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

ＷａｔｅｒｓＸ ＴｅｒｒａＣ18色譜柱（150mm×3.9mm, 4μm)

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

1.4 超聲清洗器

2 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇 0.01mol/L磷酸氫二鈉溶液=73 27

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm

2.3 柱溫：35℃

2.4 流速：0.8ml/min。進(jìn)樣量:10μＬ。

1. 稱取供試品

精密稱取供試品粉末（過(guò)四號(hào)篩)約0.05g。

2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

取真空干燥至恒重的ＨｇＣｌ₂約68ｍｇ,精密稱定,置于50ｍＬ量瓶中,以水溶解并定容至刻度。精密量取0 5ｍＬ,加水1 5ｍＬ,加入ＤＥＤＴＣ15ｍｇ,搖勻,以丙酮溶解沉淀并定容至10ｍＬ,0 45μｍ微孔濾膜過(guò)濾。

3. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品約62ｍｇ,置于消化罐中,加入2ｍＬ消化液(ＨＮＯ₃ ＨＣｌＯ₄,體積比為9∶1),密塞,置于120℃烘箱中,消化4ｈ后取出冷卻。打開(kāi)消化罐,將消化液轉(zhuǎn)移至10ｍＬ容量瓶,用超純水清洗消化罐數(shù)次,合并清洗液于容量瓶,用水定容至刻度,搖勻。精密量取2ｍＬ消化液,置于離心管中,加入0 6ｍＬ 5ｍｏｌ/Ｌ的氫氧化鈉溶液,加酚酞指示劑1滴,然后加入1ｍＬ飽和醋酸鈉緩沖液(ｐＨ8 0),搖勻,溶液應(yīng)呈粉紅色(必要時(shí)用1ｍｏｌ/Ｌ的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)溶液堿度,使其呈粉紅色)。加入15ｍｇＤＥＤＴＣ,振搖,以3000ｒ/ｍｉｎ速率離心15ｍｉｎ,棄去上清液,將沉淀用丙酮溶解,全部轉(zhuǎn)移并用丙酮定容至10ｍＬ,用0 45μｍ微孔濾膜過(guò)濾。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外檢測(cè)器測(cè)定ＨｇＤＥＤＴＣ配合物的吸收度值，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對(duì)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測(cè)定

精密吸取供試品溶液10ul注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)270nm處測(cè)定ＨｇＤＥＤＴＣ配合物的吸收值，計(jì)算出其含量。

孔愛(ài)英,姜雄平,魏立平. 高效液相色譜法測(cè)定紫金紅膠囊中朱砂的含量.色譜,20(5):449－450