排石顆�！�總黃酮的測定—分光光度法

本方法采用分光光度法測定排石顆粒中總黃酮（以蘆丁計)的含量。

供試品經(jīng)甲醇超聲提取，定容，取一定量上清液加0.1mol/L三氯化鋁與1mol/L 醋酸鉀溶液反應，再加氫氧化鈉試液，用50%甲醇定容，放置一定時間后，置于分光光度計，于波長510nm處測定吸收度，計算其總黃酮[以蘆丁（C₂₇H₃₀O₁₆)計]的含量。

1. 甲醇

2. 10%硝酸鋁溶液

3. 5%亞硝酸鈉溶液

4. 氫氧化鈉試液：取氫氧化鈉4.3g,加水溶解成100mL。

1. 可見分光光度計

2. 超聲波清洗器

1. 對照品溶液的制備

精密稱取在102℃干燥至恒重的蘆丁對照品20mg，置100mL量瓶中，加50%甲醇適量使溶解，搖勻。制成每1mL含蘆丁0.2 mg。

2. 供試品溶液的制備

取供試研細，取5g或1g（無糖型)，精密稱定，置錐行瓶中，精密加甲醇100mL，稱定重量，超聲提取20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25mL置50mL量瓶中，加水置刻度，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

1. 標準曲線的繪制

精密量取對照品溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0 mL、5.0mL，分別置10mL量瓶中，各加50%甲醇至5 mL，加5%亞硝酸鈉溶液0.3 mL ，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液0.3 mL ，放置6分鐘，加氫氧化鈉試4mL，再加50%甲醇至刻度，搖勻，以相應的溶液為空白。照分光光度法，在510nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

2. 供試品的測定

精密量取上述供試品溶液2mL，置10mL量瓶中，50%甲醇至刻度，搖勻，作為空白對照。另精密量取2mL，置10mL量瓶中，加50%甲醇至5 mL，加5%亞硝酸鈉溶液0.3 mL ，搖勻，放置6分鐘，加10%硝酸鋁溶液0.3 mL ，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液4mL，再加50%甲醇至刻度，照分光光度法，在510nm波長處測定吸收度，從標準曲線上讀出供試品中蘆丁的量，計算。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，一部，p.594。