益母草流浸膏—鹽酸水蘇堿的測定—薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測定益母草流浸膏中鹽酸水蘇堿的含量。

本方法適用于益母草流浸膏中鹽酸水蘇堿含量的測定。

供試品經(jīng)強酸性陽離子交換樹脂柱分離，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇溶解并定量稀釋，即得供試品溶液，鹽酸水蘇堿對照品加甲醇溶解并定量稀釋。點樣、展開，以乙酸乙酯-正丁醇-鹽酸（1：8：3)為展開劑，展開，取出，涼干，并在105℃加熱15分鐘，放冷，噴以稀碘化鉍鉀試液-1%三氯化鐵乙醇溶液（10：1)混合溶液至斑點顯色清晰，用薄層掃描儀進行掃描，于波長λ_S=510nm，λ_R=700nm測得供試品吸光度的積分值與對照品吸光度的積分值，計算其含量。

1. 鹽酸

2. 正丁醇

3. 乙酸乙酯

1 儀器

1.1薄層掃描儀

1.2涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.3點樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點樣器材。

1.4展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部雙槽，蓋子須密閉。

2 材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1. 對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸水蘇堿對照品適量，加甲醇制成每1mL含2mg溶液，作為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品，精密稱取約5g，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1~2，置強酸性陽離子交換樹脂柱上，以每分鐘8mL的速度用水洗至流出液近無色，棄去水液，再以每分鐘2mL的速度用2mol/L的氨水溶液150mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇溶解轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，并定量稀釋之刻度，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1. 薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2. 點樣

精密吸取供試品溶液 8μL、對照品溶液 3μL與 8μL，分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，如用點樣器點樣到薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點直徑一般不大于2mm，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。

3. 展開

將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以乙酸乙酯-正丁醇-鹽酸（1：8：3)為展開劑，展開，取出，晾干。

4. 含量測定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，進行掃描，于波長λ_S=510nm，λ_R=700nm測得供試品吸光度的積分值與對照品吸光度的積分值，計算其含量

用外標(biāo)法測定時，若對照品各數(shù)據(jù)點在校正曲線上呈一通過原點的直線時，可用一點法校正，如不通過原點通常宜采用二點法校正，必要時用多點法校正。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編、化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部p.280。