方法名稱: |
車前草--烏索酸和齊墩果酸含量測定—HPLC法 |
應用范圍: |
車前草藥材的質量控制 |
方法原理: |
車前草經(jīng)乙醇超聲提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在210nm 處測定峰面積,標準曲線法計算烏索酸和齊墩果含量。 |
儀器設備及實驗條件: |
色譜條件 色譜柱:Nova – Pak C18柱(3.9mm ×300mm,4μm,帶保護柱);流動相:甲醇-水(88:12,V /V ) ,流速為0.8ml/min;柱溫:25℃;檢測波長:210nm。 儀器設備 美國Waters515雙泵型高效液相色譜儀,2996光電二極管矩陣檢測器,77251進樣閥,20μl定量環(huán),Enpower中文色譜管理系統(tǒng) |
試樣制備: |
對照品溶液的配制 精密稱取干燥至恒重的烏索酸對照品22.8mg和齊墩果酸對照品7.8mg,置于10ml容量瓶中,加入適量甲醇溶解并定容,得對照品儲備液。精密吸取1ml儲備液置10ml容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,混合均勻,制成烏索酸和齊墩果酸的濃度分別為0.228μg/μl和0.078μg/μl對照品混合溶液,備用。 樣品溶液的制備 將烘干研細的車前草粉末精密稱取約4g,置于具塞三角燒瓶中,加入10倍量95%乙醇,采用超聲法提取60min,過濾,藥渣洗滌兩次,合并濾液于50ml容量瓶中,加乙醇定容至刻度,搖勻。濾液用0.2μm的濾膜過濾,,即得。 |
操作步驟: |
測定精密吸取車前草樣品溶液10μl,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定,外標法計算樣品中烏索酸和齊墩果酸的含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻: |
鄒盛勤.車前草中烏索酸 |