| 公開(公告)號 | CN1303104C |
| 公開(公告)日 | 2007.03.07 |
| 申請(專利)號 | CN200310106596.5 |
| 申請日期 | 2003.12.08 |
| 專利名稱 | 一種蛋白酶A抑制劑的提取方法及應(yīng)用 |
| 主分類號 | C07K14/81(2006.01)I |
| 分類號 | C07K14/81(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C12C5/02(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 江南大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 田亞平;顧國賢;章克昌;李屹松;周楠迪 |
| 地址 | 214036江蘇省無錫市惠河路170號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 無錫市大為專利商標(biāo)事務(wù)所 |
| 代理人 | 時旭丹 |
| 國省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權(quán)項 | 一種蛋白酶A抑制劑的分離提取方法，其特征是從靈芝液體深層發(fā)酵的發(fā)酵液中，通過乙醇分級沉淀或膜過濾分級獲得粗蛋白酶A抑制劑；再經(jīng)過分子篩凝膠層析后，收集分子量30KD～40KD部分凍干，即獲得精制蛋白酶A抑制劑；A)靈芝發(fā)酵液的處理：靈芝液體深層發(fā)酵的發(fā)酵液離心除去菌絲體，上清液濃縮2～3倍；B)乙醇分級沉淀或膜過濾分級；對靈芝液體深層發(fā)酵液進(jìn)行乙醇分級沉淀的處理工藝為：發(fā)酵液中先加入乙醇達(dá)30％～50％終濃度，離心后的清液中繼續(xù)加乙醇達(dá)60％～80％終濃度，離心得沉淀，真空冷凍干燥得凍干粉即為粗蛋白酶A抑制劑；或膜過濾分級：利用截留5萬～3萬分子量超濾膜進(jìn)行膜過濾得分子量在3～5萬之間的部分為粗蛋白酶A抑制劑；C)分子篩凝膠層析：采用0.01～0.05mol/L磷酸緩沖液做洗脫劑，洗脫流速為0.5～0.8ml/min，柱尺寸H/D在30～50之間，得精制的蛋白酶A抑制劑。 |
| 摘要 | 一種蛋白酶A抑制劑的提取方法及應(yīng)用，涉及從靈芝深層發(fā)酵液或靈芝發(fā)酵全粉中提取一種蛋白酶A(PrA)抑制劑及應(yīng)用。從靈芝發(fā)酵液或發(fā)酵全粉的抽提液中通過乙醇分級或膜過濾分級得粗PrA抑制劑，再經(jīng)分子篩層析收集30KD～40KD部分凍干得精制PrA抑制劑。該抑制劑可應(yīng)用于純生啤酒的生產(chǎn)中。本發(fā)明優(yōu)點是原料靈芝發(fā)酵液或發(fā)酵全粉可工業(yè)化生產(chǎn)，提取工藝簡便、設(shè)備投入少、抑制劑成本低；其應(yīng)用屬于一種后修飾手段，適量添加可提高純生啤酒泡沫穩(wěn)定性，抑制效果高，添加量較為靈活，對啤酒的色度、風(fēng)味、澄清度等品質(zhì)沒有影響；抑制劑成分主要是蛋白質(zhì)、多糖及糖蛋白，其中的高分子多糖不僅對啤酒的泡沫有利，還具一定的保健作用。 |
| 國際公布 |
