| 公開(公告)號 | CN1318448C |
| 公開(公告)日 | 2007.05.30 |
| 申請(專利)號 | CN200510059313.5 |
| 申請日期 | 2005.03.28 |
| 專利名稱 | 一種重組全長人腦紅素、其生產(chǎn)方法及其應(yīng)用 |
| 主分類號 | C07K14/795(2006.01)I |
| 分類號 | C07K14/795(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61P25/00(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所;北京蘇里曼醫(yī)藥科技有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 張成崗;王利紅;高 艷;王春麗 |
| 地址 | 100850北京市海淀區(qū)太平路27號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 魯 兵 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種重組全長人腦紅素rhNGB的生產(chǎn)方法，具體步驟包括：將工程菌接種培養(yǎng)、細(xì)菌反復(fù)凍融、菌體裂解、包涵體裂解、層析純化和目的蛋白復(fù)性；其中，所述工程菌為重組pBV220-rhNGB/HB101工程菌；所述工程菌接種培養(yǎng)基為含有100μg/ml氨芐青霉素的LB；所述包涵體裂解步驟中將所述包涵體冰浴超聲破碎后，于100℃煮沸5min。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種細(xì)菌表達(dá)生產(chǎn)重組全長人腦紅素rhNGB的方法以及用該方法得到的重組全長人腦紅素rhNGB，該方法包括將工程菌接種培養(yǎng)、細(xì)菌反復(fù)凍融、菌體裂解、包涵體裂解、層析純化和目的蛋白復(fù)性等步驟。本發(fā)明是在構(gòu)建人腦紅素基因片段NSV并構(gòu)建高效表達(dá)菌株的基礎(chǔ)上，建立了一整套工程菌誘導(dǎo)表達(dá)、包涵體分離裂解、蛋白質(zhì)復(fù)性純化的工藝，從而獲得了重組全長人腦紅素純品，并對重組全長入腦紅素的生物學(xué)活性進(jìn)行描述。實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明得到的全長人腦紅素可以作為藥物用于預(yù)防和治療中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)疾病。 |
| 國際公布 |
