| 公開(公告)號 | CN1217000C |
| 公開(公告)日 | 2005.08.31 |
| 申請(專利)號 | CN03131796.0 |
| 申請日期 | 2003.07.30 |
| 專利名稱 | 利用噬菌體展示技術(shù)展示抗原制備抗體的方法 |
| 主分類號 | C12N15/87 |
| 分類號 | C12N15/87;C12P21/08;C12P21/00;C07K16/18;C07K16/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國藥科大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 沈子龍;吳國球 |
| 地址 | 210038 江蘇省南京市童家巷24號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 南京知識律師事務(wù)所 |
| 代理人 | 胡錫瑜 |
| 國省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權(quán)項 | 一種用噬菌體展示技術(shù)展示人心肌肌鈣蛋白I抗原及其抗原表位的方法，其特征在于將人心肌肌鈣蛋白I基因插入pIII型噬菌體展示載體多克隆位點，該載體具有LacZ啟動子-Pelb引導(dǎo)序列-XcmIPCR產(chǎn)物克隆位點及多克隆位點-M13噬菌體包膜蛋白III基因部分序列；將人心肌肌鈣蛋白I基因插入載體的多克隆位點，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，在Pelb的引導(dǎo)下定位于細(xì)胞周質(zhì)腔，用輔助噬菌體VCSM13超感染，利用噬菌體自我包裝機(jī)制，將人心肌肌鈣蛋白I展示于噬菌體顆粒尾部；同時，將人心肌肌鈣蛋白I抗原表位即cTnI95-108基因插入pVIII型噬菌體展示載體多克隆位點，該載體具有LacZ啟動子-多克隆位點-M13噬菌體包膜蛋白VIII基因部分序列，插入載體內(nèi)的cTnI95-108經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，用輔助噬菌體VCSM13超感染，利用噬菌體自我包裝機(jī)制，將cTnI95-108展示于噬菌體顆粒表面。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域。利用噬菌體展示技術(shù)原理將外源抗原基因與絲狀噬菌體III基因蛋白融合展示于噬菌體顆粒尾部，將抗原表位與絲狀噬菌體VIII基因蛋白融合展示于絲狀噬菌體顆粒表面。用展示有外源抗原及抗原表位的噬菌體顆粒為免疫原制備抗體。該技術(shù)拓寬了噬菌體展示技術(shù)的應(yīng)用范圍，同時也為抗體的制備提供了新途徑。保護(hù)范圍：1.一種用噬菌體展示技術(shù)展示抗原用以制備單克隆抗體及多克隆抗體的方法。2.一種用噬菌體展示技術(shù)展示人心肌肌鈣蛋白抗原及其抗原表位用以制備cTnI單克隆抗體及多克隆抗體的方法。3.一種pIII型噬菌體展示載體pFD5。4一種噬菌體展示融合表達(dá)載體pFD5-cTnI。5一種pVIII型噬菌體展示融合表達(dá)載體PC89-cTnI95～108。6.將展示有cTnI及cTnI95～108的噬菌體顆粒作免疫原，免疫新西蘭白兔獲得cTnI抗體。 |
| 國際公布 |
