| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1687405A |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2005.10.26 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200510064798.7 |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.04.22 |
| 專利名稱 | 人卵巢癌耐藥細(xì)胞株及其培養(yǎng)方法 |
| 主分類號(hào) | C12N5/10 |
| 分類號(hào) | C12N5/10 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 李紅霞 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 李紅霞;周友珍;張素梅;魏麗惠 |
| 地址 | 100038北京市海淀區(qū)北京世紀(jì)壇醫(yī)院婦產(chǎn)科 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京市商泰律師事務(wù)所 |
| 代理人 | 谷勝斌 |
| 國(guó)省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種人卵巢癌耐藥細(xì)胞株培養(yǎng)方法，其特征在于：(1)藥物：拓?fù)涮婵?/a>(TOP)或紫杉醇(TAX)；(2)用藥劑量：采用TAX的終濃度為300ug/ml或TOP的終濃度為2160ng/ml作為大劑量沖擊用量；(3)親代細(xì)胞培養(yǎng)：人卵巢上皮癌細(xì)胞株SKOV3細(xì)胞生長(zhǎng)于含15％小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中，置入5％CO2、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；(4)卵巢癌耐藥細(xì)胞株誘導(dǎo)：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，0.25％的胰酶消化后計(jì)數(shù)，以5×105/ml細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶(以每瓶5ml接種)，24小時(shí)后細(xì)胞貼壁，再加入終濃度為300ug/ml的TAX或終濃度為2160ng/ml的TOP作用2小時(shí)，棄去培養(yǎng)液，用磷酸鹽緩沖液(PBS)洗3遍，更換新鮮培養(yǎng)液，待細(xì)胞恢復(fù)生長(zhǎng)再進(jìn)行第二次沖擊，如此反復(fù)作用，TAX共加藥沖擊12次或TOP共加藥沖擊13次，歷時(shí)10個(gè)月建成人卵巢癌耐藥細(xì)胞株SKOV3/TAX、或SKOV3/TOP。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種人卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株SKOV3/TAX或拓?fù)涮婵的退幖?xì)胞株SKOV3/TOP及其培養(yǎng)方法，其特征是選擇人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3作為親代細(xì)胞，選用TAX的終濃度為300ug/ml或TOP的終濃度為2160ng/ml作為大劑量沖擊用量，以反復(fù)大劑量沖擊方式間歇用藥，建立SKOV3/TAX細(xì)胞耐藥指數(shù)(RI)為10.57，除對(duì)TAX耐藥外，對(duì)5-氟尿嘧啶有明顯的交叉耐藥，SKOV3/TO P細(xì)胞耐藥指數(shù)(RI)為10.67，除對(duì)TOP耐藥外，對(duì)米托蒽醌(MX)、喜樹(shù)堿(CPT)、長(zhǎng)春新堿(VCR)有明顯的交叉耐藥，與敏感細(xì)胞相比P＜0.01。 |
| 國(guó)際公布 |
