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一種高效表達(dá)重組人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用

公開(公告)號(hào) CN1676600A  
公開(公告)日 2005.10.05  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510023674.4  
申請(qǐng)日期 2005.01.28  
專利名稱 一種高效表達(dá)重組人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用  
主分類號(hào) C12N1/21  
分類號(hào) C12N1/21;C12N15/70;C12N15/12;C12N15/62;C12P21/02  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 華東師范大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 賴玉平;吳自榮;黃靜;王林發(fā);左翼;李駿  
地址 200062上海市中山北路3663號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海德昭專利事務(wù)所  
代理人 程宗德;石昭  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種高效表達(dá)重組人汗腺抗菌肽的基因工程菌,其特征在于,該基因工程菌是攜帶重組質(zhì)粒的大腸桿菌DH5α、BL21(DE3),所述的重組質(zhì)粒是含人汗腺抗菌肽,即DCD-1L基因的質(zhì)粒pET32a(+)。  
摘要 一種高效表達(dá)重組人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用,屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。該基因工程菌是攜帶重組質(zhì)粒的大腸桿菌DH5α、BL21(DE3),所述的重組質(zhì)粒是含人汗腺抗菌肽,即DCD-1L基因的質(zhì)粒pET32a(+)。該基因工程菌的構(gòu)建:根據(jù)DCD-1L的基酸組成,以引物的形式合成DCD-1L的兩條DNA鏈,兩條鏈之間有26bp互補(bǔ),通過PCR擴(kuò)增獲得DCD-1L雙鏈DNA,經(jīng)酶切,插入質(zhì)粒pET-32a(+),構(gòu)建成重組質(zhì)粒pET-32a-DCD-1L,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,獲得高效表達(dá)重組人汗腺抗菌肽的基因工程菌。用所述的基因工程菌生產(chǎn)人汗腺抗菌肽的方法包括三個(gè)步驟:液體培養(yǎng);純化制得的人汗腺抗菌肽融合蛋白;和制備重組人汗腺抗菌肽。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn):生產(chǎn)重組人汗腺抗菌肽成本低;人汗腺抗菌肽的表達(dá)量高;純化步驟簡(jiǎn)便,易于操作;得率高。  
國(guó)際公布  
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