公開(公告)號 | CN1637153A |
公開(公告)日 | 2005.07.13 |
申請(專利)號 | CN200410090526.X |
申請日期 | 2004.09.03 |
專利名稱 | 用于檢測副溶血弧菌的耐熱性溶血素基因的檢測試劑 |
主分類號 | C12Q1/68 |
分類號 | C12Q1/68 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | 2003.9.5 JP 314130/2003 |
申請(專利權(quán))人 | 東曹株式會社 |
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 益田升佳;堀江隆一;保川清 |
地址 | 日本山口縣 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進(jìn)入國家日期 | |
專利代理機(jī)構(gòu) | 北京市中咨律師事務(wù)所 |
代理人 | 黃革生;隗永良 |
國省代碼 | 日本;JP |
主權(quán)項(xiàng) | 一種用于檢測樣品中存在的副溶血弧菌耐熱性溶血素(TDH)基因的檢測試劑,該檢測試劑被用于使用RNA擴(kuò)增程序的檢測方法中,所述RNA擴(kuò)增程序包括以下步驟:以一段來自所述TDH基因的RNA的特定序列作為模板,通過RNA依賴性DNA聚合酶,應(yīng)用具有與所述特定序列互補(bǔ)的序列的第一引物和具有與所述特定序列同源的序列的第二引物,生成cDNA,由此形成雙鏈RNA-DNA,其中第一引物或第二引物在其5’末端添加了RNA聚合酶的啟動子序列;通過核糖核酸酶H降解所述雙鏈RNA-DNA中的RNA部分,從而生成單鏈DNA;和以所述的單鏈DNA作為模板,通過DNA依賴性DNA聚合酶,產(chǎn)生具有所述啟動子序列的雙鏈DNA,其中所述雙鏈DNA能轉(zhuǎn)錄為由所述特定RNA序列或者所述特定RNA序列的互補(bǔ)序列組成的RNA;其中,該雙鏈DNA在RNA聚合酶的作用下生成RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,所述RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物作為模板用于隨后通過RNA依賴性DNA聚合酶合成cDNA;所述的試劑包括,第一引物,其是由SEQ.IDNo.2所示序列的至少10個(gè)連續(xù)堿基組成的寡核苷酸,或者是從SEQ.IDNo.2所示序列的至少10個(gè)連續(xù)堿基組成的寡核苷酸中缺失、替換或添加一個(gè)或多個(gè)核苷酸后能特異性結(jié)合到所述特定序列上的寡核苷酸;和第二引物,其是由SEQ.IDNo.1所示序列的至少10個(gè)連續(xù)堿基組成的寡核苷酸,或者是從SEQ.IDNo.1所示序列的至少10個(gè)連續(xù)堿基組成的寡核苷酸中缺失、替換或添加一個(gè)或多個(gè)核苷酸后能特異性結(jié)合到所述特定序列的互補(bǔ)序列上的寡核苷酸。 |
摘要 | 本發(fā)明涉及一種檢測試劑,其用于在特異性擴(kuò)增TDH RNA的擴(kuò)增程序中檢測耐熱性溶血素(TDH)基因,該試劑包括具有與來自TDH基因中的RNA的特定序列互補(bǔ)的序列的第一引物,以及具有與所述特定序列同源的序列的第二引物。 |
國際公布 |