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用于檢測副溶血弧菌的耐熱性溶血素基因的檢測試劑

公開(公告)號 CN1637153A  
公開(公告)日 2005.07.13  
申請(專利)號 CN200410090526.X  
申請日期 2004.09.03  
專利名稱 用于檢測副溶血弧菌的耐熱性溶血素基因的檢測試劑  
主分類號 C12Q1/68  
分類號 C12Q1/68  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2003.9.5 JP 314130/2003  
申請(專利權(quán))人 東曹株式會社  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 益田升佳;堀江隆一;保川清  
地址 日本山口縣  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京市中咨律師事務(wù)所  
代理人 黃革生;隗永良  
國省代碼 日本;JP  
主權(quán)項(xiàng) 一種用于檢測樣品中存在的副溶血弧菌耐熱性溶血素(TDH)基因的檢測試劑,該檢測試劑被用于使用RNA擴(kuò)增程序的檢測方法中,所述RNA擴(kuò)增程序包括以下步驟:以一段來自所述TDH基因的RNA的特定序列作為模板,通過RNA依賴性DNA聚合酶,應(yīng)用具有與所述特定序列互補(bǔ)的序列的第一引物和具有與所述特定序列同源的序列的第二引物,生成cDNA,由此形成雙鏈RNA-DNA,其中第一引物或第二引物在其5’末端添加了RNA聚合酶的啟動子序列;通過核糖核酸酶H降解所述雙鏈RNA-DNA中的RNA部分,從而生成單鏈DNA;和以所述的單鏈DNA作為模板,通過DNA依賴性DNA聚合酶,產(chǎn)生具有所述啟動子序列的雙鏈DNA,其中所述雙鏈DNA能轉(zhuǎn)錄為由所述特定RNA序列或者所述特定RNA序列的互補(bǔ)序列組成的RNA;其中,該雙鏈DNA在RNA聚合酶的作用下生成RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,所述RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物作為模板用于隨后通過RNA依賴性DNA聚合酶合成cDNA;所述的試劑包括,第一引物,其是由SEQ.IDNo.2所示序列的至少10個(gè)連續(xù)堿基組成的寡核苷酸,或者是從SEQ.IDNo.2所示序列的至少10個(gè)連續(xù)堿基組成的寡核苷酸中缺失、替換或添加一個(gè)或多個(gè)核苷酸后能特異性結(jié)合到所述特定序列上的寡核苷酸;和第二引物,其是由SEQ.IDNo.1所示序列的至少10個(gè)連續(xù)堿基組成的寡核苷酸,或者是從SEQ.IDNo.1所示序列的至少10個(gè)連續(xù)堿基組成的寡核苷酸中缺失、替換或添加一個(gè)或多個(gè)核苷酸后能特異性結(jié)合到所述特定序列的互補(bǔ)序列上的寡核苷酸。  
摘要 本發(fā)明涉及一種檢測試劑,其用于在特異性擴(kuò)增TDH RNA的擴(kuò)增程序中檢測耐熱性溶血素(TDH)基因,該試劑包括具有與來自TDH基因中的RNA的特定序列互補(bǔ)的序列的第一引物,以及具有與所述特定序列同源的序列的第二引物。  
國際公布  
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