公開(公告)號
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CN1616109A
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公開(公告)日
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2005.05.18
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申請(專利)號
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CN200410073125.3
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申請日期
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2004.09.29
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專利名稱
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MG7-Ag模擬表位構(gòu)建胃癌特異性多表位基因疫苗的方法
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主分類號
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A61K48/00
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分類號
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A61K48/00;A61P35/00;C12N15/12
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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吳開春;陳瑜;寧小萱;丁杰;樊代明
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地址
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710032陜西省西安市長樂西路17號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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西安通大專利代理有限責(zé)任公司
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代理人
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李鄭建
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國省代碼
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陜西;61
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主權(quán)項
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一種MG7-Ag模擬表位構(gòu)建胃癌特異性多表位基因疫苗的方法,其特征在于,采用單一表位以同源串聯(lián)形式,以HSP70為載體,GGGS為間隔序列,連續(xù)四次PCR,并以前一次PCR的產(chǎn)物作為下一次PCR的模版,將四個不同的模擬表位以及間隔序列連接起來;構(gòu)建含有4個串聯(lián)不同的MG7-Ag模擬表位與HSP70的融合基因疫苗,其串聯(lián)表位的具體核苷酸以及氨基酸序列如下:KPHVHTKGGGSAAACCACATCTACATACAAAAGGAGGAGGAAGTKPHLHFHGGGSAAACCACATCTTCATTTTCATGGAGGAGGAAGTKPHSHLHGGGSAAACCACATAGTCATCTTCATGGAGGAGGAAGTSWAPVYARANAGTTGGGCTCCAGTTTATGCTAGAGCTAAT。
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摘要
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本發(fā)明公開了以胃癌MG7-Ag模擬表位為基礎(chǔ)構(gòu)建的多表位DNA疫苗及其方法。本發(fā)明利用HSP70為載體,GGGS為間隔序列,構(gòu)建含有4個串聯(lián)不同的MG7-Ag模擬表位與HSP70的融合基因疫苗。經(jīng)Western blotting鑒定表明融合基因在小鼠骨髓瘤SP2/0細(xì)胞中成功表達(dá),并保持了親本蛋白各自的活性。質(zhì)粒免疫接種后,融合基因疫苗可誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗MG7-Ag特異性抗體以及一定數(shù)量的特異性CTL分泌IFNγ,多表位疫苗免疫組優(yōu)于單表位疫苗組和其他對照組。腫瘤攻擊后,疫苗免疫組小鼠成瘤體積明顯小于對照組。這一基因疫苗在胃癌的免疫治療研究,胃癌特異性疫苗的研制方面將具有巨大的潛在價值。
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國際公布
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