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短的雙鏈RNAs的體外合成方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1604963A  
公開(kāi)(公告)日 2005.04.06  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN02822098.6  
申請(qǐng)日期 2002.10.30  
專(zhuān)利名稱(chēng) 短的雙鏈RNAs的體外合成方法  
主分類(lèi)號(hào) C12N15/11  
分類(lèi)號(hào) C12N15/11;C12Q1/68;A61K31/713  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2001.11.5 US 60/337,975  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 詹森藥業(yè)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 M·D·德貝克;A·N·哈里斯  
地址 比利時(shí)比爾斯  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng) PCT/EP2002/012165 2002.10.30  
進(jìn)入國(guó)家日期 2004.05.08  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 中國(guó)專(zhuān)利代理(香港)有限公司  
代理人 李波;徐雁漪  
國(guó)省代碼 比利時(shí);BE  
主權(quán)項(xiàng) 一種用于合成靶特異性短的雙鏈RNAs的方法,包括以下步驟:a)在一種反應(yīng)混合物中混合靶特異性有義核苷酸模板和鏈延伸酶,以便形成模板延伸的有義寡核糖核苷酸產(chǎn)物;b)在一種反應(yīng)混合物中混合靶特異性反義寡核苷酸模板和鏈延伸酶,以便形成模板延伸的反義寡核糖核苷酸產(chǎn)物;和c)讓在步驟a)中獲得的有義寡核糖核苷酸產(chǎn)物與在步驟b)中獲得的互補(bǔ)性反義寡核糖核苷酸產(chǎn)物雜交。  
摘要 本發(fā)明涉及合成短的雙鏈RNAs的領(lǐng)域。披露了利用噬菌體聚合酶和用靶序列特異性單鏈DNA寡核苷酸作模板的體外轉(zhuǎn)錄方法。本發(fā)明特別適用于合成短的干擾RNAs(siRNAs),業(yè)已證實(shí)這種干擾RNAs是在植物中的轉(zhuǎn)錄后基因沉默期間引起序列特異性RNA降解,以及無(wú)脊椎動(dòng)物和脊椎動(dòng)物系統(tǒng)的RNA干擾中的關(guān)鍵中間體。  
國(guó)際公布 WO2003/040294 英 2003.5.15  
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