| 公開(公告)號(hào) | CN1193092C |
| 公開(公告)日 | 2005.03.16 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN03116090.5 |
| 申請(qǐng)日期 | 2003.03.28 |
| 專利名稱 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離和體外擴(kuò)增培養(yǎng)方法 |
| 主分類號(hào) | C12N5/08 |
| 分類號(hào) | C12N5/08 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 浙江大學(xué);杭州大力神醫(yī)療器械有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 王金福 |
| 地址 | 310027 浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 |
| 代理人 | 趙杭麗;張法高 |
| 國(guó)省代碼 | 浙江;33 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離和體外擴(kuò)增培養(yǎng)方法，從骨髓中分離單核細(xì)胞，先進(jìn)行細(xì)胞原代貼壁培養(yǎng)，再依據(jù)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)記抗原對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行免疫抗體分選，其特征是：采用正、負(fù)向免疫分選結(jié)合的方法進(jìn)行免疫抗體分選，純化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，獲得CD14-CD105+細(xì)胞，在體外培養(yǎng)體系中繼代擴(kuò)增培養(yǎng)，進(jìn)行正、負(fù)向免疫分選純化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的步驟為：第一步進(jìn)行陰性免疫篩選，采用CD14標(biāo)記磁珠分選，獲得CD14-細(xì)胞，第二步進(jìn)行陽性免疫篩選，采用CD105標(biāo)記磁珠分選，獲得CD14-CD105+細(xì)胞。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了一種骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離和體外擴(kuò)增培養(yǎng)方法。為了有效提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外純化率和擴(kuò)增能力，在分離骨髓單核細(xì)胞的基礎(chǔ)上，采用貼壁培養(yǎng)原代細(xì)胞后，再采用正、負(fù)向免疫分選結(jié)合的方法進(jìn)行免疫抗體分選，純化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，并在隨后的純化細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)中，建立含有人參皂甙多糖的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)體系，可提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外擴(kuò)增和繼代培養(yǎng)能力，達(dá)到建立人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞株系的目的。 |
| 國(guó)際公布 |
