公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1162547C
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公開(kāi)(公告)日
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2004.08.18
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN02135393.X
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申請(qǐng)日期
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2002.08.30
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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靶向肝癌的乙肝病毒反義RNA表達(dá)載體及其構(gòu)建方法與用途
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主分類(lèi)號(hào)
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C12N15/86
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分類(lèi)號(hào)
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C12N15/86;C12N15/11;C12N7/01;C12Q1/68;A61K39/29;A61K48/00
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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山東大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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孫汶生;馬春紅;張利寧;曹英林;劉素俠
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地址
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250100 山東省濟(jì)南市山大南路27號(hào)
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頒證日
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2004.08.18
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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濟(jì)南三達(dá)專(zhuān)利事務(wù)所
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代理人
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孫君
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國(guó)省代碼
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山東;37
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主權(quán)項(xiàng)
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靶向肝癌的乙肝病毒反義RNA表達(dá)載體,其特征在于是以EB病毒表達(dá)質(zhì)粒pEBAF為載體,由AFP啟動(dòng)子控制的、僅特異性表達(dá)于AFP陽(yáng)性的肝癌組織表達(dá)載體,構(gòu)建的三種HBV反義RNA表達(dá)載體pEBAF-as-preS2、pEBAF-as-preS1、pEBAF-as-X分別含有HBV preS2(3203-340)、preS1(2301-2925)和X(1370-1873)區(qū)段基因。
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摘要
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靶向肝癌的乙肝病毒反義RNA表達(dá)載體及其構(gòu)建方法與用途,屬于乙肝病毒相關(guān)肝細(xì)胞肝癌的基因治療物。本發(fā)明是以EB病毒表達(dá)質(zhì)粒pEBAF為載體,由AFP啟動(dòng)子控制的、僅特異性表達(dá)于AFP陽(yáng)性的肝癌組織表達(dá)載體,構(gòu)建的三種HBV反義RNA表達(dá)載體pEBAF-as-preS2、pEBAF-as-preS1、pEBAF-as-X分別含有HBV preS2、preS1和X區(qū)段基因。反義RNA表達(dá)載體的制備方法,包括:擴(kuò)增目的基因、設(shè)計(jì)引物,PCR擴(kuò)增HBpreS2、HBpreS1、HBX基因,體外重組,包括目的基因與質(zhì)粒DNA的酶切、純化及連接、轉(zhuǎn)化,含目的基因陽(yáng)性重組子的篩選、鑒定,包括重組子質(zhì)粒DNA的抽提、雙輪PCR篩選及測(cè)序鑒定。本發(fā)明的反義RNA表達(dá)載體用于乙肝病毒相關(guān)肝細(xì)胞肝癌及慢性乙肝病毒感染的治療物質(zhì)。
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國(guó)際公布
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