公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1439650A
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公開(kāi)(公告)日
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2003.09.03
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN02106193.9
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申請(qǐng)日期
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1999.07.01
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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利用水禽制備多株抗體的方法
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主分類(lèi)號(hào)
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C07K16/02
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分類(lèi)號(hào)
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C07K16/02;C07K1/16
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
99109616.9
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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邱義能
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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邱義能
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地址
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臺(tái)灣省臺(tái)中市
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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隆天國(guó)際知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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高龍?chǎng)?潘培坤
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國(guó)省代碼
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臺(tái)灣;71
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主權(quán)項(xiàng)
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一種自水禽產(chǎn)蛋中純化多株抗體的方法,其包括:(1)以水為溶劑,自該產(chǎn)蛋的蛋黃中粗分離IgY:可使用自來(lái)水、純水蒸餾水、去離子水,或?yàn)閜H≥5.1的微酸或含0.05%以下的非離子洗滌劑水溶液或0.15-1.0M食鹽水溶液,磷酸鹽緩沖液或三羥甲基氨基甲烷緩沖液;(2)添加硫酸銨,使達(dá)30-50%的飽和度,或添加硫酸鈉,使達(dá)14-20%(w/v)的濃度,在其濃度下重復(fù)進(jìn)行鹽析;(3)使用含疏水基膠體進(jìn)行層析IgY:(a)所述的疏水基膠體選自下列物質(zhì):丁基瓊脂糖、辛基瓊脂糖、苯基瓊脂糖、烷基瓊脂糖、甲基丙烯酸甲酯和甲基丙烯酸丁基酯;(b)層析管柱的操作條件:(i)管柱平衡緩沖液在pH7.0-8.0;(ii)平衡緩沖液為1.0M的硫酸銨或硫酸鈉,其電導(dǎo)度為110-200ms/ml;(iii)洗脫方式可用梯度洗脫或單液洗脫:梯度洗脫:A液為前述b(ii),B液為不帶鹽的緩沖液,單液洗脫:預(yù)先將A液及B液混合并調(diào)整其電導(dǎo)度為45-80 ms/ml。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種利用水禽制備多株抗體的方法,其是將蛋鴨經(jīng)肌肉注射抗原誘發(fā)抗體后收取所產(chǎn)鴨蛋,取出蛋黃后經(jīng)一系列蛋白質(zhì)純化步驟再經(jīng)疏水基膠體層析及透析、脫鹽、濃縮等過(guò)程再以SDS-丙烯酰胺膠體電泳,分析可得純度為96%以上之高純度且不含F(xiàn)c端的蛋黃免疫球蛋白。經(jīng)分析,其結(jié)果發(fā)現(xiàn)此種抗體制備方法不但可制成具高特異性及稀釋能力的多株抗體,更可有效避免以往常存在以哺乳類(lèi)為中間宿主所制成的多株抗體所產(chǎn)生的假陽(yáng)性反應(yīng)。
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國(guó)際公布
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