公開(公告)號
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CN1126816C
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公開(公告)日
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2003.11.05
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申請(專利)號
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CN99119039.4
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申請日期
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1999.09.10
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專利名稱
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可用于大規(guī)模生產(chǎn)的重組腺病毒伴隨病毒生產(chǎn)方法及用途
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主分類號
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C12N7/01
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分類號
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C12N7/01;C12N15/861;C12N15/33;C12N15/38;A61K48/00;A61P43/00;//(C12N7/01,C12R1:92)
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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本元正陽基因技術(shù)股份有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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吳小兵;伍志堅;侯云德
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地址
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100176北京市北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)永昌中路 6 號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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北京;11
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主權(quán)項
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一種重組腺病毒相關(guān)病毒rAAV病毒的大規(guī)模生產(chǎn)和制備的方法,其特征是,該方法包括:(1)建立“一株載體細(xì)胞”即重組AAV載體細(xì)胞株;(2)制備和產(chǎn)生“一株全功能輔助病毒”;(3)用全功能輔助病毒感染載體細(xì)胞株;(4)載體細(xì)胞株在全功能輔助病毒感染的作用下產(chǎn)生大量的rAAV病毒。
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摘要
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本發(fā)明提出一種“一株載體細(xì)胞/一株輔助病毒”生產(chǎn)重組AAV病毒的方法。其中載體細(xì)胞株是將含有外源基因表達(dá)單位的重組AAV載體質(zhì)粒導(dǎo)入哺乳動物細(xì)胞,經(jīng)抗性篩選獲得的整合了可拯救的重組AAV DNA的穩(wěn)定傳代的細(xì)胞株。輔助病毒是攜帶AAV rep/cap基因的重組HSV-1病毒。用這種全功能輔助病毒感染載體細(xì)胞株即可產(chǎn)生大量有感染性的重組AAV病毒。本發(fā)明可用于重組AAV病毒的規(guī)模化高效生產(chǎn)。
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國際公布
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