公開(公告)號 | CN1438316A |
公開(公告)日 | 2003.08.27 |
申請(專利)號 | CN03113968.X |
申請日期 | 2003.03.21 |
專利名稱 | 酵母菌表達系統(tǒng)中表達人卵透明帶ZP3蛋白的方法 |
主分類號 | C12N15/81 |
分類號 | C12N15/81;C07K14/435 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 暨南大學 |
發(fā)明(設計)人 | 謝琪璇;潘善培 |
地址 | 510632廣東省廣州市天河區(qū)黃埔大道西601號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 廣州華進聯(lián)合專利商標代理有限公司 |
代理人 | 王東亮 |
國省代碼 | 廣東;44 |
主權(quán)項 | 一種酵母菌表達系統(tǒng)中表達人卵透明帶ZP3蛋白的方法,采用受體菌GS115、目的蛋白及載體質(zhì)粒、線性化酶等;包括的步驟有擴增目的蛋白片段、重組質(zhì)粒的構(gòu)建、重組質(zhì)粒的篩選和鑒定、重組質(zhì)粒導入Pichia pastoris表達系統(tǒng)、重組子(工程菌)的篩選、重組蛋白的表達、重組蛋白的純化,其特征是:所述目的蛋白是23~408位氨基酸基因片段;所述的載體質(zhì)粒是pPIC9k;所述重組質(zhì)粒構(gòu)建時,插入該載體質(zhì)粒的ZP3目的基因片段是在前面引入了6個組氨酸序列的23~408位氨基酸;所述的重組質(zhì)粒導入前,先將重組質(zhì)粒用SacI酶進行線性化,然后從酵母基因組的AoxI基因處插入。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種酵母菌表達系統(tǒng)中表達人卵透明帶ZP3蛋白的方法,載體質(zhì)粒為pPIC9k,目的蛋白選用了23~408位氨基酸,串聯(lián)組氨酸序列片段連在目的蛋白的N末端,導入前采用SacI酶對重組質(zhì)粒進行線性化。表達生成的ZP3蛋白分泌及溶解性好,便于應用。 |
國際公布 |