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高效表達水蛭素及其生產方法

公開(公告)號 CN1328380C  
公開(公告)日 2007.07.25  
申請(專利)號 CN01141415.4  
申請日期 2001.09.24  
專利名稱 高效表達水蛭素及其生產方法  
主分類號 C12N15/15(2006.01)I  
分類號 C12N15/15(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/64(2006.01)I;C07K14/815(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 天津天士力制藥股份有限公司  
發(fā)明(設計)人 趙 凱;吳祖澤;苑 賓;張津輝;李滿文;熊志紅;蔣中華;董春娜;曹菊榮;于愛平  
地址 300402天津市北辰科技園遼河東路1號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構  
代理人  
國省代碼 天津;12  
主權項 一種新型編碼水蛭素的DNA分子,其特征在于該DNA分子與來源于水蛭的天然的水蛭素2型DNA分子相比,該DNA分子的第121位核苷酸由胞苷酸變異為鳥苷酸、第156位核苷酸由胸苷酸變異為胞苷酸,第157位核苷酸由腺苷酸變異為鳥苷酸;其前導序列為CTCGAGAAAAGA。  
摘要 本發(fā)明涉及一種生物工程的抗栓藥物及其生產方法,具體而言是涉及一種新型水蛭素及其生產方法。采用全人工合成的方法獲得變異的HV2全基因,在其5’端上游加入一段合適前導序列。構建畢赤酵母分泌型表達載體pHV2,載體轉化宿主細胞GS115,并整合入宿主細胞的染色體中。篩選高效表達菌株,經優(yōu)化發(fā)酵誘導、分離純化步驟,提高了重組基因產物的生產效率,產物表達水平和生物學活性,以及對抗凝、抗栓的藥效學研究表明,高于文獻報道,這為水蛭素II型的大規(guī)模生產和臨床應用的深入研究提供了物質來源。  
國際公布  
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