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感謝大夫?yàn)槲铱焖俳獯稹撊绾沃委熀头乐?/p>
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1.病毒分離 鑒定病毒的分離是診斷偽狂犬病的可靠方法�；疾�(dòng)物的多種病料組織如腦、心、肝、脾、肺、腎、扁桃體等均可用于病毒的分離，但以腦組織和扁桃體最為理想，另外，鼻咽分泌物也可用于病毒的分離。病料處理后可直接接種敏感細(xì)胞，如豬腎傳代細(xì)胞（PK-15和IBRS-2)、倉(cāng)鼠腎傳代細(xì)胞（BHK-21)或雞胚成纖維細(xì)胞(CEF)，在接種后24?72h內(nèi)可出現(xiàn)典型的細(xì)胞病變。若初次接種無(wú)細(xì)胞病變，可盲傳3代。不具備細(xì)胞培養(yǎng)條件時(shí)，可將處理的病料接種家兔或小鼠，根據(jù)家兔或小鼠的臨診表現(xiàn)做出判定，但小鼠不如家兔敏感。分離到病毒后再用標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清做中和試驗(yàn)以確診本病。2.組織切片 焚光抗體檢測(cè)取患病動(dòng)物的病料如腦或扁桃體的壓片或冰凍切片，用直接免疫熒光檢查。其優(yōu)點(diǎn)是快速，在幾小時(shí)內(nèi)即可獲得可靠結(jié)果，對(duì)于新生仔豬，其敏感性與病毒分離相當(dāng)，但對(duì)于育肥豬與成年豬，該法則不如病毒分離敏感。3.PCR檢測(cè) PRV利用PCR可從患病動(dòng)物的分泌物如鼻咽拭子或組織病料中擴(kuò)增PRV的基因，從而對(duì)患病動(dòng)物進(jìn)行確診。PCR與病毒分離鑒定相比，具有快速、敏感、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，能同時(shí)檢測(cè)大批量的樣品，并且能進(jìn)行活體檢測(cè)，適合于臨診診斷。4.血清學(xué)診斷 多種血清學(xué)方法可用于偽狂犬病的診斷，應(yīng)用最廣泛的有中和試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)及間接免疫熒光等。其中血清中和試驗(yàn)的特異性、敏感性都是最好的，并且被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE)列為法定的診斷方法。但由于中和試驗(yàn)的技術(shù)條件要求高、時(shí)間長(zhǎng)，所以主要是用于實(shí)驗(yàn)室研究。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)同樣具有特異性強(qiáng)、敏感性髙的特點(diǎn)，3?4h內(nèi)可得出試驗(yàn)結(jié)果，并可同時(shí)檢測(cè)大批量樣品，廣泛用于偽狂犬病的臨診診斷。另外，近幾年來(lái)，乳膠凝集試驗(yàn)以其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)也在臨診上廣泛應(yīng)用，乳膠凝集試驗(yàn)可謂“傻瓜”技術(shù)，操作極其簡(jiǎn)便，幾分鐘之內(nèi)便可得出試驗(yàn)結(jié)果。5.鑒別診斷 PRV鑒別診斷方法是在使用基因標(biāo)志疫苗的基礎(chǔ)上應(yīng)用的一類診斷方法。由于PRV中存在多個(gè)非心需糖蛋白基因，缺失這些基因的病毒突變株不能產(chǎn)生被缺失基因所編碼的糖蛋白，但又不影響病毒在細(xì)胞上的增殖與免疫原性。將這種基因缺失標(biāo)志疫苗注射動(dòng)物后，動(dòng)物不能產(chǎn)生針對(duì)缺失蛋白的抗體。因此，可通過(guò)血清學(xué)方法將自然感染野毒的血清學(xué)陽(yáng)性豬與注苗豬區(qū)分開來(lái)。目前，缺失疫苗缺失的糖蛋白基因主要為gE和gG基因，也有缺失gC、gB基因的。針對(duì)缺失的糖蛋白已利用大腸桿菌或酵母等表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)產(chǎn)物建立了相應(yīng)的鑒別診斷方法：gE-ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))、gG-ELISA、gC-ELISA、gB-ELISA以及gE-LAT(乳膠凝集試驗(yàn))、gG-LAT等，實(shí)驗(yàn)證實(shí)這些方法的特異性強(qiáng)、敏感性高，可用于臨診檢測(cè)，同時(shí)乳膠凝集還具有簡(jiǎn)單、快速的特點(diǎn)。
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