棗樹是我國的特有樹種,雞心棗是河
南棗區(qū)的一個名優(yōu)
品種,雞心棗品質(zhì)優(yōu)良,適宜鮮食、制干和加工。棗樹常年靠根蘗繁殖,造成棗瘋病傳播,棗瘋病是我國棗樹上的毀滅性病害,多數(shù)感病
品種幼苗當(dāng)年即枯死,幼樹1~2年死亡,成年結(jié)果樹棗果逐年下降,病枝上開出變態(tài)花器,不結(jié)果,或結(jié)不成熟的畸形果,完全失去食用價(jià)值,最終造成果樹死亡。要解決這一問題,可通過培育熱處理與微莖尖結(jié)合培養(yǎng)脫毒棗苗,并采用組培方法進(jìn)行快速繁殖。下面就工廠化生產(chǎn)脫毒雞心棗進(jìn)行介紹。
1 材料與方法
選用河南省新鄭棗科所特優(yōu)品種雞心棗為試材,一年生根蘗苗定植于溫室內(nèi),第二年2~4月份取其萌發(fā)的棗頭芽,用稀釋的洗潔精浸泡15分鐘,再以自來水沖凈后,置于超凈工作臺上,用70%的酒精
消毒45秒,無菌水沖洗一遍,再用0.1%升汞
消毒7分鐘,無菌水沖洗4~5遍,在體視境下一一剝?nèi)ト~片至0.5~0.1cm時(shí)接種于培養(yǎng)基上,接種后置于光強(qiáng)2500lx,溫度27~29℃培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng),光照時(shí)間14小時(shí)/天。誘導(dǎo)出的試管苗在38℃光照培養(yǎng)箱內(nèi)熱處理60天,熱將處理的試管苗在無菌條件下剝?nèi)?.1~0.3mm的莖尖,在啟動培養(yǎng)基中培養(yǎng)出試管苗,把莖尖試管苗送到中國林業(yè)
科學(xué)院森保所病鑒室,經(jīng)病毒檢測完全脫除棗瘋病,然后進(jìn)行組織培養(yǎng)快速繁殖,夏、秋、冬季進(jìn)行培養(yǎng)室內(nèi)組培快繁,翌年3月上旬開始生根,4月份開始室外溫室大棚內(nèi)煉苗、移栽,6月份實(shí)施營養(yǎng)缽栽培或大田栽培。為降低
成本,配置培養(yǎng)基時(shí)用白砂糖代替蔗糖,用自來水代替去離子水。
2 結(jié)果與討論
2.1 啟動培養(yǎng)基 選用同一種培養(yǎng)基與四種激素組合:(1)MS+6~BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L;(2)MS+6~BA5.0mg/L+NAA0.3mg/L;(3)MS+6~BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L;(4)MS+6~BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L。結(jié)果表明,第三種配方最佳,接種到這種培養(yǎng)基上的外植體,3周后開始生長、分化并長成一棵苗,40天后可以切段增殖培養(yǎng)。
2.2 熱處理微莖尖脫毒 經(jīng)初代培養(yǎng)的試管苗在培養(yǎng)箱內(nèi)溫度從30℃逐漸升高到38℃,開始計(jì)時(shí),熱處理60天,中間換一次培養(yǎng)基。莖尖培養(yǎng)苗經(jīng)PCR擴(kuò)增方法檢測脫除棗瘋病類菌質(zhì)體。
2.3 繼代增殖培養(yǎng)基 選用三種激素組合:(1)MS+6~BA1.0mg/L+I(xiàn)BA0.5mg/L;(2)MS+6BA1.5mg/L+I(xiàn)BA0.5mg/L;(3)MS+6~BA2.0mg/L+I(xiàn)BA0.5mg/L。結(jié)果表明,第二種培養(yǎng)基及激素組合最佳,轉(zhuǎn)接帶葉莖段1.5cm長,1個月可增殖4.5倍左右,幼苗生長健壯。
2.4 生根試驗(yàn)&
m.bhskgw.cn/shouyi/yu/jiage/nbsp;共用四種組合:(1)1/2MS+I(xiàn)BA0.3mg/L+NAA0.3mg/L;(2)1/2MS+I(xiàn)BA0.5;(3)1/2MS+I(xiàn)BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L;(4)1/2MS+I(xiàn)BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L。結(jié)果表明,第四種培養(yǎng)基發(fā)根早,生根率達(dá)到100%,每株根數(shù)3條以上,平生根長2cm以上。
2.5 試管苗馴化移栽 棗樹苗喜歡高溫強(qiáng)光照,4月下旬開始閉瓶溫室內(nèi)煉苗,煉苗20天,然后打開瓶口2~3天,注意保濕,取出試管苗,洗凈根部培養(yǎng)基,栽入盛有
珍珠巖的育苗盤,扣上小拱棚保濕,并在每天上午10時(shí)到下午4時(shí)罩上遮陽網(wǎng)防強(qiáng)光直射,濕度保持在90%左右,溫度30%左右,10天后,可適當(dāng)通風(fēng)降濕,隨后撤去遮陽網(wǎng)和小拱棚,將棗苗栽入泥炭土和田園土1∶1的混合土中,1個月后可入大田。采用這種方法移栽試管苗成活率可達(dá)90%以上。
3 小結(jié)
本項(xiàng)研究成功地解決了脫毒雞心棗組織培養(yǎng)工廠化快速育苗的
技術(shù)與方法。按每次成功培養(yǎng)脫毒苗40株,從7月份到翌年3月份共繼代增殖9次,到秋末繁育脫毒雞心棗苗木數(shù)量為40×57×90%=280萬棵。采用這種方法可以快速進(jìn)行繁育脫毒棗苗,以滿足生產(chǎn)需要,提高棗樹產(chǎn)量和品質(zhì)。
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