我們舉例如下:
如不美觀尺度不美觀糖溶液度為每100ml溶液含糖262.5mg。對于10ml斐林試液從9-5可以查得不美觀糖液滴定應(yīng)為20ml。如不美觀不是20ml,可先算出A,B液校正等數(shù)。然后進(jìn)行計(jì)較
再如尺度糖溶液濃度為每100ml溶液含糖199.3ml,對于10mlA,B液從9-4中查到,糖液滴定量應(yīng)為25.00ml,若有收支可校正。如不美觀要求不高,可省略校正軌范但要求1%得測定誤差,則省略校正。此外有時(shí)辰并未按照檢索表計(jì)較樣含糖量,但對A,B液進(jìn)行標(biāo)定,以使確定相當(dāng)?shù)眠原糖量。這種誤差為0.5%。下面我們講標(biāo)定量A,B液切切實(shí)確稱取烘干冷卻得A.R蔗糖1.5g→用水消融稱取250ml容量瓶中→定容→吸50ml于100ml定量瓶中→加HCL5ml→再65-70攝氏度水裕15分鐘→冷卻→用30%NaOH中和→定容切確吸A,B液各5ml于三角瓶中→加水約50ml玻璃珠三粒→加熱至沸→連結(jié)1分鐘→加指示劑1滴→再煮1分鐘→當(dāng)即用糖液滴定至蘭色褪去,紅色呈現(xiàn)即為終點(diǎn)正式滴定,先插手比預(yù)滴按時(shí)少0.5ml擺布得糖液煮沸1分鐘→加指示劑1滴→再煮沸1分鐘→繼續(xù)滴至終點(diǎn)
計(jì)較:A=W*V/500×0.95
A:相當(dāng)于10ml斐林氏A、B液的轉(zhuǎn)化糖的量
W:稱取蔗糖的質(zhì)量
V:滴定蔗糖的量
500:稀釋比
0.95:換算等數(shù)
最后計(jì)較:
總糖(還原糖)以轉(zhuǎn)化糖計(jì)%=(A*1000/W*V)*100
A:同上
W:制取樣品的量
V:滴定是時(shí)樣品耗損量
1000:是稀釋倍數(shù)(100/50*500)
1.展望定的目的:對樣品溶液中還原糖濃度有必然要要求(0.1%擺布),測按時(shí)樣品溶液的耗損體積應(yīng)該與標(biāo)定葡萄糖標(biāo)液的耗損體積四周,經(jīng)由過程測定體味樣品濃度是否合適,濃渡過大或過小應(yīng)該加根柢整,使測按時(shí)耗損樣品溶液量在10毫升擺布醫(yī),學(xué).全,在.線m.bhskgw.cn;二是經(jīng)由過程測定可知道此溶液的概略耗損量,以便在正式的滴按時(shí),預(yù)先插手比現(xiàn)實(shí)用量少1毫升擺布的樣液,只留下1ml擺布的樣液在續(xù)滴按時(shí)插手,以便保證在1分鐘內(nèi)完成續(xù)滴定工作,提交展望定的切確度。
2.此嘗試影響測定結(jié)不美觀的首要操作身分是反映液堿度、熱源強(qiáng)度,煮沸時(shí)刻和滴定速度一般煮沸時(shí)刻短耗損糖多,反之,耗損糖液少,滴定速渡過快,耗損糖量多,反之,耗損糖量少。此外溶液堿度愈高,二價(jià)銅的還原愈快,是以必需嚴(yán)酷節(jié)制反映的體積,使反映系統(tǒng)堿度一致。熱源一般采用800W電爐,反映液在2秒內(nèi)沸騰。
(二)KMNO4(高錳酸鉀法)
1.事理,還原糖在堿性溶液中使銅鹽還原成氧化亞銅,在酸性前提下,氧化亞銅能使硫酸鐵還原為硫酸亞鐵,再用KMNO4溶液滴定硫酸亞鐵,即可標(biāo)出還原糖的量。
2.操作體例
(1)樣品措置
a.乳糖:搜羅乳制品以及含卵白質(zhì)的冷食類
稱樣2-5g(液體樣25~50ml)→于250ml容量瓶→加水50ml→加A液10ml+1NNaOH4ml→定容→靜置30秒→過濾→棄去初液→可測還原糖及蔗糖用。
b.低酒度飲料:麥精露、各類汽酒等飲料。
先暴氣除CO2→取100ml→于蒸發(fā)皿中→用1NNaOH中和→滾水浴蒸至原體積四分之→轉(zhuǎn)入250ml容量瓶→加50ml水→搖勻→(加A液10ml→加1NNaOH4ml)→加水至刻度→靜置30秒→過濾。
c.含多量淀粉的食物:嬰兒食物、糕干粉、寶寶樂、代乳粉、餅干、面包、糕點(diǎn)等
稱樣10-20g→250ml容量瓶→加水200ml→45度水浴加熱1小時(shí)→不竭搖動(dòng)→冷后加水至刻度→靜置→吸出清夜200ml于另一容量瓶(250ml)→加A液10ml+1NNaOH4ml→靜置30秒→過濾。
d.汽水、不美觀露、國產(chǎn)七種可樂及可口可樂
措置CO2→吸樣液100ml→于250ml容量瓶→加水至刻度→可測還原糖及蔗糖。
(2)測定體例
取50ml措置的樣液→于400ml燒杯→加A、B液各25ml→加熱在4min擺布沸騰→再煮2min→趁熱抽濾→用60℃水洗燒杯和沉淀→直到洗液不成堿性→將抽濾的紙(或者石棉)及Cu2O→轉(zhuǎn)入原本燒杯→用25ml硫酸鐵溶沖要刷抽濾瓶→使沖刷液全數(shù)洗入原燒杯中→加水25ml→使Cu2O消融→用0.1NKMnO4標(biāo)液滴定至微紅色,同時(shí)用50ml水按上述體例做空白嘗試。
(3)計(jì)較
3.注重事項(xiàng):
(1)煮沸后的溶液顯紅色不顯蘭色,則暗示糖量高,可削減取樣體積。
(2)在洗滌Cu2O的整個(gè)過程中應(yīng)使沉淀上層連結(jié)一層水層,以阻遏距離空氣,避免Cu2O被空氣中的氧所氧化。
(3)此法合用于各類食物中還原糖的測定,有色樣液不受限制,切確度高,重現(xiàn)性好。切確性和重現(xiàn)性都優(yōu)于直接滴定法,但操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí),需使用特制的高錳酸鉀法糖類檢索表。
(二)直接滴定法(斐林氏溶液法)
1.事理
樣品經(jīng)由措置除去卵白質(zhì)等雜質(zhì)后,插手鹽酸,在加熱前提下使蔗糖水解為還原性單糖,用直接滴定法測定水解后
樣品中的還原糖總量。
2.試劑
3.體例
(1)取過量樣品進(jìn)行提取,放入250ml容量瓶,加5ml醋酸鋅和5ML亞鐵氰化鋅,定容,靜止30分后過濾,濾液備用。
(2)測定
樣品預(yù)滴定:
取A、B液各5ml于三角瓶中加水10ml,玻璃珠數(shù)粒,加熱在2分內(nèi)沸騰,趁熱滴定,滴定到蘭色褪去,記適用量。
正式滴定:
取A、B液各5mL于三角瓶→加玻璃珠三粒→從滴定管直接加比預(yù)滴按時(shí)少0.5-1.0ML樣液,在2分沸騰,趁熱滴定蘭色褪去,記實(shí),取三次平均值計(jì)較結(jié)不美觀。
三.蔗糖的測定
1.事理:樣品除卵白質(zhì)后,其中的蔗糖經(jīng)鹽酸水解轉(zhuǎn)化為還原糖,用還原糖的測定體例,確定樣品中蔗糖的含量。
現(xiàn)實(shí)上測定還原糖搜羅兩部門m.bhskgw.cn:一是樣品華夏有的還原糖、二是蔗糖經(jīng)酸水解后的還原糖。
2.體例
吸還原糖樣品措置稀釋液50mL→于100ML容量瓶→加→于68-70度水浴上15分→冷卻→加甲基紅2滴→中和→定容→取此溶液按還原糖的測定體例測定。
2.計(jì)較
蔗糖%=F(100/V2-100/V1)/(W╳50/250╳1000)╳100╳0.95
式中:F:10ml斐林氏試液相當(dāng)于轉(zhuǎn)化糖的質(zhì)量mg。
V1:測按時(shí)耗損未經(jīng)水解的樣品稀釋體積ml
V2:測按時(shí)耗損經(jīng)由水解的樣品稀釋體積ml
w:原測定還原糖時(shí)樣品的重量(G)
1000:將毫升換算成克
0.95:分子的蔗糖經(jīng)水解后成為2分子的還原糖(一分子的葡萄糖和一分子的不美觀糖)蔗糖的分子量為342,后來成為2×180.則342/360=0.95.所以轉(zhuǎn)化糖換算到蔗糖應(yīng)乘以0.95.
四.紙上層析法.
在食物中,糖的組分較為復(fù)雜,在淀粉糖漿中含有麥芽糖、葡萄糖、麥芽三糖、麥芽四糖等多種組分.對于這些食物中的各類組分,不成能用化學(xué)剖析體例進(jìn)行測定,而用物理剖析體例進(jìn)行測定.
紙層析應(yīng)用于糖類的分手剖析,它操作同化物中各組分物理化學(xué)性質(zhì)的分歧,使各組分以分歧速度移動(dòng)而達(dá)到分手.
比移值Rf==組分睜開的距離/溶劑睜開的距離
糖的RF值的紀(jì)律為:
單糖>雙糖>三糖
戊糖>己糖
酮糖>醛糖
嘗試室常用的睜開劑:
正丁醇:HAc:H2O==4:1:5
常用的顯色劑:
0.1NAgNO3:NH4OH(SN)=1:1(活絡(luò)度高,但黑點(diǎn)易擴(kuò)散)
AgNO3/丙酮:NaOH/乙醇=1:1(戰(zhàn)勝膳縵沔錯(cuò)誤謬誤)
(顯色劑書上給出良多,同窗們可以自己看)
樣品的措置可采用常規(guī)法如:糖的提取和卵白質(zhì)的除去可看前面講的。
按照Rf值可求出各類糖的Rf與尺度樣品的Rf值進(jìn)行斗勁,可確定出糖的種類,也可進(jìn)行定量,用黑點(diǎn)光密度定量法直接在濾紙上測定.用黑點(diǎn)面積校正進(jìn)行定量。