溶組織內(nèi)阿米巴(Entamoeba histolytica Schaudinn,1903),即痢疾阿米巴,為侵襲型阿米巴病的病原蟲,主要寄生于結(jié)腸,引起阿米巴痢疾和各種類型的阿米巴病,為全球分布,多見于熱帶與亞熱帶。據(jù)統(tǒng)計(jì),在全球超過5億的阿米巴感染者中,侵襲型的年發(fā)病率高達(dá)4千萬例以上,至今每年死于阿米巴病的人數(shù)不少于4萬,當(dāng)前在醫(yī)學(xué)上的重要性已被認(rèn)為僅次于瘧疾與血吸蟲病。
人類對(duì)阿米巴病早有認(rèn)識(shí)與記載。古希臘希波克拉蒂對(duì)痢疾的潛在傳染性和并發(fā)癥-肝瀉(hepatic flux)已有明確論述;我國(guó)古代醫(yī)書《內(nèi)經(jīng)素問》《傷寒論》等也記有“下痢”,“赤痢”,“疫痢”等有關(guān)鑒別診斷的臨床經(jīng)驗(yàn)。阿米巴痢疾的病原體則由俄羅斯醫(yī)師 лйщ于1975年首先發(fā)現(xiàn),至1903年由德國(guó)著名微生物學(xué)家Schaudinn定名。對(duì)于溶組織內(nèi)阿米巴的生物學(xué)、種群毒力及其致病作用和機(jī)制的研究已歷經(jīng)100多年,直到20世紀(jì)60年代末美國(guó)學(xué)者Diamond開拓?zé)o共生物純培養(yǎng)之后,才為細(xì)胞及分子水平的生物、生化及免疫學(xué)研究提供了高純高的蟲體材料,從而取得新的進(jìn)展。雖然還留有不少有待深入探討的問題,對(duì)于持續(xù)了大半個(gè)世紀(jì)有關(guān)種株與毒力的爭(zhēng)論熱點(diǎn),已有初步結(jié)論,從生化構(gòu)成、免疫原性以及基因分析確認(rèn)了英國(guó)學(xué)者Brumpt早在1925年即已提出的善于致病與非致病品系屬于不同種群的論斷。
形態(tài)與生活史
近代研究表明,溶組織內(nèi)阿米巴應(yīng)是一個(gè)包含兩種在形態(tài)學(xué)難于區(qū)分而致病力顯著不同的種群復(fù)合體,即存在著侵襲型和非侵襲型(或稱致病和非致病型或弱致病型)兩個(gè)不同的種。長(zhǎng)期以來,人們?cè)噲D以此解釋阿米巴感染的低發(fā)病率(<10%)現(xiàn)象,但只有通過70年代末期以來從生化、免疫以及遺傳研究的不斷探索,終于獲得了細(xì)胞與分子生物學(xué)的確鑿證據(jù),并根據(jù)研究提供的信息的數(shù)據(jù),Diamond和Clark(1993)確認(rèn)這兩個(gè)種的存在,重新描述了沿用Entamoeba histolytica Schaudinn,1903學(xué)名的侵襲型種的形態(tài)學(xué),用以區(qū)分非致病種,Entamoeba dispar Brumpt,1925。鑒于這兩個(gè)種的區(qū)分目前僅借助于生化與基因分析手段,對(duì)于溶組織內(nèi)阿米巴的有關(guān)生物學(xué)描述,仍須借鑒傳統(tǒng)的復(fù)合群體概念。醫(yī)學(xué)全在線www.med126.com
溶組織內(nèi)阿米巴的生活史有滋養(yǎng)體、囊前期、包囊和囊后滋養(yǎng)體各期(圖10-1,2),其中囊前期和囊后滋養(yǎng)體分別是滋養(yǎng)體轉(zhuǎn)化為包囊和包圳轉(zhuǎn)化為滋養(yǎng)體的短暫過渡期,僅出現(xiàn)于腸道寄生階段。整個(gè)生活史過程僅須一種哺乳類宿主,人是主要的適宜宿主。猿、獼猴、犬、豬、鼠均有自然或?qū)嶒?yàn)感染的報(bào)道,但并無重要流行病意義。
圖10-1 溶組織內(nèi)阿米巴 (鐵蘇木素染色)
滋養(yǎng)體期系該阿米巴的基本生活型,通常在結(jié)腸腔內(nèi)以二分裂法繁殖。直徑10~40µm,個(gè)體大小隨種系而有差異,可大至60µm以上。在光鏡下觀察活體,可見較白細(xì)胞稍大的折光性活動(dòng)小體,在適宜溫度下運(yùn)動(dòng)活潑,常伸出單一偽足作定向阿米巴運(yùn)動(dòng)。掃描電鏡觀察,可見在表膜的一個(gè)部位附有許多小泡,為偽尾區(qū),可能是一個(gè)排廢部位。滋養(yǎng)體需經(jīng)固定染色后方可辨明內(nèi)部結(jié)構(gòu)。最常用鐵蘇木素染色,在高倍放大的光鏡下,胞質(zhì)可辨認(rèn)較透明的外質(zhì)和顆粒狀內(nèi)質(zhì),內(nèi)質(zhì)含一典型泡狀核,直徑4~7µm,在不著色的纖薄核膜內(nèi)緣有排列整齊的單層染色質(zhì)粒(chromatin granules),有一個(gè)位于正中或稍偏位的粒狀核仁,核仁與核膜之間隱約可見網(wǎng)狀核纖絲。典型的核結(jié)構(gòu)有助于蟲種鑒別;胞質(zhì)內(nèi)含食物泡及吞噬的紅細(xì)胞。電鏡下,滋養(yǎng)體的外被可見由兩層電子致密層組成的典型單位膜結(jié)構(gòu)及外層絨毛狀糖萼外被。后者的厚度在腸壁病灶分離的滋養(yǎng)體常數(shù)倍于無共生物培養(yǎng)的個(gè)體。表膜還分布有許多含肌動(dòng)蛋白的絲狀突起為絲狀偽足,可證明參與阿米巴的侵襲機(jī)制。掃描電鏡下的表膜還可見大小不一的杯狀吞噬微口(phagocytic stomata),司吞噬與吞飲的功能。內(nèi)質(zhì)中可見眾多的食物泡、空泡和大小不等的糖原粒,另有微管、溶酶體及小泡狀或管狀內(nèi)質(zhì)網(wǎng),迄今未發(fā)現(xiàn)有線粒體、糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和典型的高爾基復(fù)合體。
在腸腔內(nèi)增殖的滋養(yǎng)體可隨腸內(nèi)容物下移,隨著腸內(nèi)環(huán)境的變化,如水分逐漸被吸收等,停止活動(dòng),團(tuán)縮,排出未消化食物,形成囊前期,此期胞質(zhì)內(nèi)有時(shí)可出現(xiàn)一種特殊的營(yíng)養(yǎng)儲(chǔ)存結(jié)構(gòu) ──擬染色體(chromatoid body),經(jīng)分析系由90%以上的核糖核蛋白體聚合而成,能被深染,呈現(xiàn)獨(dú)特的短棒狀,為蟲種鑒別的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)。囊前期形成后,胞質(zhì)分泌囊壁包裹于質(zhì)膜之外,形成圓形的包囊期。包囊直徑在10~20µm之間,電鏡下可見囊壁為雙層。包囊初期只具一個(gè)胞核,隨后二次分裂為4核,偶見8核,糞便中可查到成熟度不同的1核、2核或成熟的4核包囊,核的結(jié)構(gòu)同滋養(yǎng)體期,在1或2核包囊可見糖原泡和棍狀的擬染色體。碘染時(shí)包囊呈淡棕色或黃色,糖原泡為棕紅色(彩圖Ⅲ)鐵蘇木素染色的包囊為深藍(lán)色,糖原泡被溶解成空泡,擬染色體色深更清晰。包囊為阿米巴的傳播階段,僅見于宿主的糞便內(nèi),4核包囊具感染性,在傳播上起重要作用,為阿米巴的傳播階段,僅見于宿主的糞便內(nèi),4核包囊具感染性,在傳播上起重要要作用,入侵組織的滋養(yǎng)體不形成包囊,復(fù)合體內(nèi)侵襲與非侵襲種的包囊則無法從形態(tài)學(xué)上加以腸下段經(jīng)鹼性消化液作用后,囊壁變薄,蟲體活躍,隨即脫囊而出形成含4個(gè)胞核的囊后滋養(yǎng)體。此期歷時(shí)甚短,脫囊后核很快各分裂一次,繼之胞體分為8個(gè)個(gè)體較小的小滋養(yǎng)體,在回盲部定居于結(jié)腸粘膜皺褶或腸腺窩間,以宿主腸粘液、細(xì)菌及已消化食物為營(yíng)養(yǎng),發(fā)育至一定大小后不斷以二分裂增殖。在腸腔內(nèi)的滋養(yǎng)體稱小滋養(yǎng)體,蟲體較小(10~20µm)也稱腸腔共棲型。小滋養(yǎng)體在某種因素影響下可不同程度地入侵腸壁,可吞噬紅細(xì)胞和組織細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榇笞甜B(yǎng)體,也稱組織型滋養(yǎng)體,其體積較大(20~40µm),運(yùn)動(dòng)活潑,并不斷破壞腸壁組織,引起原發(fā)病灶;侵入腸組織的滋養(yǎng)體可隨血流至肝或其他部位;也可能隨壞死組織脫落入腸腔,在急性期腸蠕動(dòng)增加的情況下,大滋養(yǎng)體無成囊的充分時(shí)間,致使大量排出體外。(圖10-2)。由于滋養(yǎng)體對(duì)外環(huán)境的抵御力很弱,故在傳播上不起作用。而在無癥狀帶蟲者的正常糞便中可排出大量包囊,成為流行病學(xué)上的重要傳染源。據(jù)估計(jì)一個(gè)帶蟲者每天排出的包囊可逾5000多個(gè)。