膠體金制備完畢后須經(jīng)電鏡下質(zhì)量鑒定才能應(yīng)用。
一、膠體金顆粒直徑測定
用預(yù)先處理好的覆有Formvar膜的鎳網(wǎng)浸入膠體金溶液內(nèi),取現(xiàn)放在空氣中干燥或37℃烤箱烤干。然后在透射電鏡下觀察,主要觀察金顆粒的大小,符合不符合所需要的顆粒直徑,金顆粒是否均勻一致,有無橢圓形及多角形金顆粒存在。理想的金顆粒是大小基本相等,均勻一致,無橢圓形及多角形的金顆粒存在,還可以拍片放大后測量金顆粒直徑的大小。
二、膠體金金顆粒均勻度測定
一般需測量100個(gè)以上的膠體金顆粒,然后用統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,計(jì)算膠體金顆粒的平均直徑及標(biāo)準(zhǔn)差,前者反映顆粒的大小,后者說明顆粒是否均勻一致。
三、影響膠體金顆粒大小的因素
如果有較多的大小不等的金顆粒及有橢圓形,三角形金顆粒存在應(yīng)重新制備。一般造成這種情況的主要原因是在加還原劑的時(shí)候不是迅速一次加入,而是多次加入。再者攪拌不均勻,速度太慢沒有攪拌起來,造成了顆粒大小不等。制備量的多少,容器的大小,加熱的時(shí)間等也影響膠體金顆粒的大小。制備了合格的膠體金以后,放在室溫或4℃保存。避免低溫凍存,因?yàn)閮龃婵蓪?dǎo)致膠體金凝集,破壞了膠體狀態(tài)。膠體金在室溫避光無灰塵的環(huán)境中可放置3個(gè)月左右。冰箱內(nèi)半年左右。根據(jù)膠體金的性質(zhì),有不穩(wěn)定和聚沉的可能性,因此,制備完畢后最好在20天以內(nèi)進(jìn)行標(biāo)記。