1979年Teffreys根據(jù)β珠蛋白基因座位近旁出現(xiàn)的RFLP頻率同測定的核苷酸總數(shù)，推算出人體基因組的遺傳異質性約為每100個核苷酸中有一個差異。后在人體DNA隨機片段的文庫中分離出高度變異的超變區(qū)。從1982年起，分別在人的胰島素基因，α類珠蛋白基因，肌動蛋白基因和C-Ha-ras-1基因中陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了這些超變區(qū)。這是一些很短的順序或稱“小衛(wèi)星順序”串聯(lián)重復所組成。不同等位基因的重復數(shù)目也不相同。只要用重復順序內(nèi)不含切點的限制性內(nèi)切酶切割，就可產(chǎn)生長度不等的限制性片段。
短的重復順序分別長16、17、32、33、37、41、62、64和376bp，但這些重復順序幾乎都共有一種“核心順序”�！昂诵捻樞颉遍L10～15bp。如果人工合成很短的重復順序作為DNA分子雜交的探針，同經(jīng)限制性內(nèi)切酶酶切的人體DNA作Southern印跡雜交，可以得長度不等的雜交帶。雜交帶的數(shù)目的分子量大小幾乎不可能有兩個人會完全相同的，因此把這種雜交帶的圖型稱為“DNA指紋”（DNa finger-printing)，意思是DNA的雜交帶型同指紋一樣，也是每個人所特有的。
表23-8比較了用兩種探針進行印跡雜交后，出現(xiàn)雜交帶的長度和數(shù)目。根據(jù)計算，如果只用一種探針，則A個體DNA所呈現(xiàn)的雜交帶型，同樣出現(xiàn)在B個體DNA中的概率為3×10-11。如果同時用兩種探針進行比較，則兩個個體完全相同的概率小于5×10-19。目前全世界人口為50億，即5×109。因此，兩個個體的DNA雜交帶型完全相同的可能性極小。
表23-8 隨機匹配的個體間“DNA指紋”相同的概率
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探針 |
DNA片段大小（k) |
每一個體中片段 出現(xiàn)的數(shù)目±SD |
A個體中的片段也出現(xiàn)于B個體的概率 |
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A |
10～20 |
2.8±1.0 |
0.11 |
|
6～10 |
5.1±1.3 |
0.18 | |
|
4～6 |
5.9±1.6 |
0.28 | |
|
B |
10～20 |
2.9±1.0 |
0.08 |
|
6～10 |
5.1±1.1 |
0.20 | |
|
4～6 |
6.7±1.2 |
0.27 |
1985年Teffreys等將“DNA指紋”應用于法醫(yī)鑒定。他們從血斑、精斑或新鮮毛發(fā)根部抽提微量DNA后作印跡雜交。從4年前的精斑、血斑樣品中仍能提取出來未降解的DNA，特別是設計出一些方法可從婦女陰道分泌物中，把混在里面的精子分離出來。從中提取DNA后可明確無誤地鑒定誰是精子的供體。為法醫(yī)鑒定提供一種新的有效方法。醫(yī)學全.在.線m.bhskgw.cn
參考文獻
1．Drake JW, et al.Updating the theory of mutation. American Scientist, 1983; 71:621
2.Jukes TH, et al. Evolutionary nucleotide replacements in DNA.Nature, 1979;281:605
3.趙壽元.自然科學年鑒.上海翻譯出版公司，1987
4．Maniatis T, et al. Moleculer cloning: A laboratory Manual. Cold Sping Harbor Laboratory, 1982
5.Myers RM, et al. Dctection of single base substitutions by ribonuclease cleavage at mismatches in RNA:DNA duplexes. Sicence, 1985;230:1242
6.Mullis K, et al. Specific enzymatic amplificaton of DNAin vitro. The polymerase chain reaction. Cold Spring Harbor Symposia on Qantitative Biol,1986; L1:263
7.金冬雁，等譯.分子克隆實驗指南.北京:科學出版社,1992
8.孫乃恩,等編著.分子遺傳學.南京:南京大學出版社,1993
9.邱澤生,主編.基因工程.北京:首都師范大學出版社,1992
10.張昌穎,主編.核酸生物化學.北京:人民衛(wèi)生出版社,1993
11.杜傳書,劉祖洞,主編.醫(yī)學遺傳學.第二版,北京:人民衛(wèi)生出版社,1992
