硝酸毛果蕓香堿滴眼液—硝酸毛果蕓香堿的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定硝酸毛果蕓香堿滴眼液中硝酸毛果蕓香堿（C₁₁H₁₆N₂O₂·HNO₃)的含量。

本方法適用于硝酸毛果蕓香堿滴眼液中硝酸毛果蕓香堿的含量測定。

取本品適量，置于50mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各10mL，置50mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取硝酸毛果蕓香堿對照品適量，精密稱定，同法測定。按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計算，即得。

1. 甲醇

2. 稀醋酸

3. 醋酸鈉

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按硝酸毛果蕓香堿峰計算應(yīng)不低于1000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇＋水溶液（含2.94g醋酸鈉和38.4mL稀醋酸)= 400 600

2.2 檢測波長：230nm

2.3 柱溫：室溫

1.稀醋酸

取冰醋酸60mL，加水稀釋至1000mL，即得。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取硝酸毛果蕓香堿對照品50mg，置于50mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，為對照品溶液。

3. 內(nèi)標(biāo)溶液的配制

精密量取苯甲酸，加流動相溶解并稀釋制成每1mL中含90μg的溶液，搖勻，為內(nèi)標(biāo)溶液。

4. 供試品溶液的制備

精密稱取本品適量（約相當(dāng)于硝酸毛果蕓香堿50mg)，置于50mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

精密量取供試品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各10mL，置50mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，精密吸取上述溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長230nm處測定硝酸毛果蕓香堿的吸收值，另精密量取對照品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各10mL同上處理，測定。計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p707。