方法名稱: |
冬蟲夏草發(fā)酵液凍干粉—蟲草素和腺苷的含量測(cè)定-- HPLC法 |
應(yīng)用范圍: |
測(cè)定冬蟲夏草發(fā)酵液凍干粉中蟲草素和腺苷的含量 |
方法原理: |
冬蟲夏草發(fā)酵液凍干粉加入90%甲醇回流提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在260nm測(cè)定峰面積,標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定蟲草素和腺苷的含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器設(shè)備 日本島津高效液相色譜系統(tǒng)( 泵SHIMADZU LC-10ATvp 、紫外檢測(cè)器SHIMADZU SPD-10Atvp、柱溫箱(天津奧特賽恩斯AT-330); |
試樣制備: |
蟲草素標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密稱取2.25 mg蟲草素對(duì)照品,90%甲醇定容至25mL,然后用90 %甲醇分別稀釋成0.45、1.26、4.50、9.00、13.50、18.00μg/mL系列對(duì)照溶液,分別取以上不同濃度的對(duì)照溶液準(zhǔn)確進(jìn)樣5μL,以峰面積對(duì)溶液濃度進(jìn)行回歸,即得。 腺苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密稱取2.20mg腺苷對(duì)照品,90%甲醇定容至25mL,然后用90 %甲醇分別稀釋成1.76、4.40、8.80、13.50、17.60、μg/mL系列對(duì)照溶液,分別取以上不同濃度的對(duì)照溶液準(zhǔn)確進(jìn)樣5μL,以峰面積對(duì)溶液濃度進(jìn)行回歸,即得。 |
操作步驟: |
依供試品溶液的制備方法,制得供試品溶液,注入高效液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定,計(jì)算含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
王海霞,胡高升,蒙婭等.RP-HPLC 法測(cè)定冬蟲夏草發(fā)酵液凍干粉中蟲草素和腺苷含量.中國食品衛(wèi)生雜志.2007,19(4):309-312 |