方法名稱: |
生發(fā)散—2,3,5,4’四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于生發(fā)散中2,3,5,4’四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量的測(cè)定 |
方法原理: |
本品粗粉加50%乙醇超聲提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在320nm處測(cè)定峰面積,以外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器設(shè)備 LC-10Avp 高效液相色譜儀;SPDM10A二極管陣列檢測(cè)器;CLASS-VP色譜工作站。 色譜條件 色譜柱:Hypersil BDS C18柱(4.6mm×150 mm,5μm;流動(dòng)相:乙睛-水(18:82);流速:0.8ml/min;檢測(cè)波長(zhǎng):320nm;柱溫:40℃。 |
試樣制備: |
對(duì)照品溶液制備 精密稱取2,3,5,4’-四輕基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷對(duì)照品, 加乙醇配制成0.2mg/ml的溶液,即得。 供試品溶液的制備 本品1g,精密稱定,置錐形瓶中,精密加人50%乙醇25ml,稱定重量,加熱回流30min,放冷,再稱定重量,用50%乙醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,上清液用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò),棄去初濾液,收集續(xù)濾液,作為供試品溶液。 |
操作步驟: |
精密吸取對(duì)照液以及供試品溶液5μL ,分別注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積,計(jì)算2,3,5,4’-四輕基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
扈本荃,史亞軍,黃萍等. HPLC-UV法測(cè)定生發(fā)散中經(jīng)茂衍生物的含量. 中國(guó)中藥雜志.2002,27(12):913~915 |