| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1935266A |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2007.03.28 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200510086513.X |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.09.23 |
| 專利名稱 | 一種建立轉(zhuǎn)hCGβ基因的小鼠乳腺癌腫瘤模型的方法 |
| 主分類號(hào) | A61K49/00(2006.01)I |
| 分類號(hào) | A61K49/00(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 石樹(shù)群;彭景楩 |
| 地址 | 100080北京市海淀區(qū)北四環(huán)路25號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京泛華偉業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 高存秀 |
| 國(guó)省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種建立轉(zhuǎn)hCGβ基因的小鼠乳腺癌腫瘤模型的方法，包括下述步驟： 1)制得全長(zhǎng)基因hCGβ，該基因在基因文庫(kù)編號(hào)為：hCGβ：NM000737； 2)回收純化上述hCGβcDNA片段； 3)將步驟2)得到的hCGβcDNA片段重組到帶有pEGFP標(biāo)記的真核表達(dá)載體中，構(gòu)建成pEGFP-hCGβ真核表達(dá)質(zhì)粒； 4)將pEGFP-hCGβ真核表達(dá)質(zhì)粒經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染小鼠乳腺癌細(xì)胞； 5)用流式細(xì)胞儀篩選熒光陽(yáng)性pEGFP-hCGβ轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺癌細(xì)胞； 6)使用Western-Blotting驗(yàn)證步驟5)中熒光陽(yáng)性pEGFP-hCGβ轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺癌細(xì)胞中hCGβ蛋白表達(dá)； 7)流式細(xì)胞儀三次富集篩選技術(shù)獲得轉(zhuǎn)hCGβ基因的小鼠乳腺癌細(xì)胞； 8)將步驟7)中測(cè)得的pEGFP-hCGβ轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺癌細(xì)胞注射到小鼠的乳腺位置，得到了轉(zhuǎn)hCGβ基因的小鼠乳腺癌腫瘤模型。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種建立轉(zhuǎn)人絨毛膜促性腺激素β亞單位(hCGβ)基因的小鼠乳腺癌腫瘤模型的方法，其為采用帶有綠色熒光基因與hCGβ基因的共同表達(dá)真核表達(dá)載體pEGFP，結(jié)合流式細(xì)胞儀經(jīng)過(guò)三次富集篩選技術(shù)，解決了現(xiàn)有技術(shù)提取單克隆很難獲得轉(zhuǎn)hCGβ基因細(xì)胞的難題，填補(bǔ)了沒(méi)有建立分泌hCGβ腫瘤動(dòng)物模型的空白，可以用于研究hCGβ與乳腺癌腫瘤發(fā)生，增殖，遷移和分化的機(jī)理，為在體評(píng)價(jià)CGβ抗腫瘤的效果提供小型動(dòng)物模型。這對(duì)CGβ在防治hCGβ分泌型腫瘤的基礎(chǔ)理論研究和臨床前的應(yīng)用研究具有重要意義。另外，其使用綠色熒光基因與hCGβ的共同表達(dá)，使在體直接觀察腫瘤的生長(zhǎng)，轉(zhuǎn)移成為可能。 |
| 國(guó)際公布 |
