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抗乙肝病毒的雞卵黃免疫球蛋白IgY及其分離方法

公開(公告)號 CN1935841A  
公開(公告)日 2007.03.28  
申請(專利)號 CN200610015578.X  
申請日期 2006.09.04  
專利名稱 抗乙肝病毒的雞卵黃免疫球蛋白IgY及其分離方法  
主分類號 C07K16/02(2006.01)I  
分類號 C07K16/02(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 天津大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 孫淑清;馬向輝  
地址 300072天津市南開區(qū)衛(wèi)津路92號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 天津市北洋有限責(zé)任專利代理事務(wù)所  
代理人 陸 藝  
國省代碼 天津;12  
主權(quán)項(xiàng) 一種抗乙肝病毒的雞卵黃免疫球蛋白IgY,其特征是用下述方法分離制成: (1)動(dòng)物免疫用乙肝病毒表面抗原HbsAg作為免疫原,對產(chǎn)蛋雞進(jìn)行免疫,收集雞蛋于4℃儲(chǔ)存; (2)分離純化分離出雞卵黃,用6~9倍體積的去離子水稀釋,用0.1MHCl調(diào)節(jié)pH為4.5~5.5,加入氯化鈉至0.1~0.2M,4℃放置5~6小時(shí),在3500轉(zhuǎn)/分下離心分離20~25分鐘,棄去沉淀,向上清液中加入硫酸鈉至質(zhì)量百分濃度為18~20%,進(jìn)行第一次鹽析,在3500轉(zhuǎn)/分,離心分離出蛋白質(zhì)沉淀,沉淀加去離子水至沉淀完全溶解為止,加入硫酸鈉至質(zhì)量百分濃度為14~16%,進(jìn)行第二次鹽析,離心分離,獲得的蛋白質(zhì)沉淀加去離子水至沉淀完全溶解為止,將此溶液用2.5×100cm Sephadex G-150凝膠柱過濾,過濾之前,凝膠柱用25mM pH=8的磷酸鹽緩沖液預(yù)平衡,洗脫液流速200ml/小時(shí),洗脫出的蛋白質(zhì)流分用紫外光度計(jì)監(jiān)測,吸收波長為280nm,收集第一條譜帶,用聚乙二醇反透析濃縮,再透析除鹽,得到一種抗乙肝病毒的雞卵黃免疫球蛋白IgY。  
摘要 本發(fā)明公開了一種抗乙肝病毒的雞卵黃免疫球蛋白IgY及其分離方法,分離方法是:(1)動(dòng)物免疫;(2)分離純化分離出雞卵黃,用去離子水稀釋,調(diào)節(jié)pH,加氯化鈉放5~6小時(shí),離心分離,棄去沉淀,向上清液中加入硫酸鈉進(jìn)行第一次鹽析,離心分離出蛋白質(zhì)沉淀,沉淀加去離子水至沉淀完全溶解為止,加入硫酸鈉進(jìn)行第二次鹽析,離心分離,獲得的蛋白質(zhì)沉淀加去離子水至沉淀完全溶解為止,用凝膠柱過濾,洗脫出的蛋白質(zhì)流分用紫外光度計(jì)監(jiān)測,吸收波長為280nm,收集第一條譜帶,經(jīng)反透析濃縮,再透析除鹽,得到一種抗乙肝病毒的雞卵黃免疫球蛋白IgY,本發(fā)明的分離方法,工藝簡單,成本低廉,所得樣品質(zhì)量較好。  
國際公布  
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