| 公開(公告)號(hào) | CN1810959A |
| 公開(公告)日 | 2006.08.02 |
| 申請(專利)號(hào) | CN200610033007.9 |
| 申請日期 | 2006.01.13 |
| 專利名稱 | 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及培養(yǎng)方法及醫(yī)用組合物 |
| 主分類號(hào) | C12N5/08(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N5/08(2006.01)I;A61K35/50(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 深圳市北科生物科技有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 胡 祥;楊 波 |
| 地址 | 518057廣東省深圳市南山區(qū)科技園深港產(chǎn)學(xué)研基地大樓西座W400座 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 深圳市中知專利商標(biāo)代理有限公司 |
| 代理人 | 宋湘紅 |
| 國省代碼 | 廣東;44 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及培養(yǎng)方法，其特征在于包括如下順序的步驟： (1)取人羊膜先用胰蛋白酶消化，然后用膠原酶、脫氧核糖核酸酶消化，得到細(xì)胞懸液； (2)將上一步所得的細(xì)胞懸液過濾，制成單細(xì)胞懸液； (3)將第(2)步所得細(xì)胞接種于培養(yǎng)基中，置于37℃、飽和濕度、體積分?jǐn)?shù)為5％的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，并通過換液和傳代，使人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞逐漸得到擴(kuò)增和純化，所述培養(yǎng)基采用VDMEM∶VF12＝1∶1的DMEM/F12培養(yǎng)基，其中含有體積百分含量為10％-20％的胎牛血清和終濃度為10-20ng/ml的堿性成纖維生長因子。 |
| 摘要 | 本發(fā)明為一種人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及培養(yǎng)方法及醫(yī)用組合物，分離及培養(yǎng)方法是將人羊膜用胰蛋白酶、膠原酶、脫氧核糖核酸酶相繼消化，然后過濾制成單細(xì)胞懸液，再采用加有體積百分含量為10％-20％的胎牛血清和終濃度為10-20ng/ml的堿性成纖維生長因子的VDMEM∶VF12＝1∶1的DMEM/F12培養(yǎng)基，置于37℃、飽和濕度、體積分?jǐn)?shù)為5％的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，通過換液和傳代，使人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞逐漸得到擴(kuò)增和純化。本發(fā)明方法具有來源廣泛，不受倫理限制等優(yōu)越性，具有廣闊的應(yīng)用前景，本發(fā)明的醫(yī)用組合物可用于神經(jīng)替代治療、用于心肌梗塞的治療、用于糖尿病的治療、用于骨組織工程、應(yīng)用于整形外科等。 |
| 國際公布 |
