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櫛孔扇貝H2A基因克隆與N末端表達(dá)技術(shù)

公開(公告)號 CN1800389A  
公開(公告)日 2006.07.12  
申請(專利)號 CN200510044889.4  
申請日期 2005.10.08  
專利名稱 櫛孔扇貝H2A基因克隆與N末端表達(dá)技術(shù)  
主分類號 C12N15/12(2006.01)I  
分類號 C12N15/12(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)I;A23K1/16(2006.01)I;A23L3/34(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國科學(xué)院海洋研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 宋林生;李成華;趙建民;相建海  
地址 266071山東省青島市市南區(qū)南海路7號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 山東濟(jì)南齊魯科技專利事務(wù)所有限公司  
代理人 宋永麗  
國省代碼 山東;37  
主權(quán)項(xiàng) 一種克隆得到的櫛孔扇貝H2A基因,其特征在于櫛孔扇貝H2A基因的基因組序列和該基因編碼的基酸序列以及其中的部分序列,該基因基因組DNA有一個375bp的開放閱讀框,編碼125個氨基酸,3’非編碼區(qū)長包含有兩個終止信號,即莖環(huán)結(jié)構(gòu)和多聚腺苷酸加尾信號。利用pPIC9K表達(dá)載體在畢赤酵母中表達(dá)了該蛋白N末端的39aa,表達(dá)產(chǎn)物對革蘭氏陽性細(xì)菌藤黃微球菌、革蘭氏陰性菌亮弧菌和畢赤酵母均具有明顯的抑菌活性。  
摘要 本發(fā)明涉及分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域,是櫛孔扇貝蛋白H2A基因克隆及N末端抗菌多肽的克隆表達(dá)技術(shù)。本發(fā)明利用同源克隆技術(shù)獲得了櫛孔扇貝組蛋白H2A基因組全長,該基因DNA有一個375bp的開放閱讀框,編碼125個氨基酸,3’非編碼區(qū)包含有兩個終止信號,即莖環(huán)結(jié)構(gòu)和多聚腺苷酸加尾信號。利用pPIC9K表達(dá)載體在畢赤酵母(Pichia pastoris)中表達(dá)了該蛋白N末端的39aa,表達(dá)產(chǎn)物對革蘭氏陽性細(xì)菌藤黃微球菌(Micrococcus luteus)和革蘭氏陰性菌亮弧菌(Vibrio splendidus)均具有明顯的抑菌活性,其中對陽性菌的活性大于陰性菌;同時表達(dá)產(chǎn)物對畢赤酵母也有較明顯的抑菌活性。本發(fā)明利用同源克隆技術(shù)和體外重組表達(dá)技術(shù)從櫛孔扇貝中表達(dá)了具有較強(qiáng)抑菌效果的組蛋白N末端活性多肽,可為進(jìn)一步研究櫛孔扇貝新穎的防御機(jī)制提供基礎(chǔ),并為櫛孔扇貝的病害防治、基因輔助選育及進(jìn)一步開發(fā)為醫(yī)藥產(chǎn)品和飼料添加劑奠定基礎(chǔ)。  
國際公布  
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