核酸聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增的優(yōu)化方法
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公開(公告)號
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CN1289687C
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公開(公告)日
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2006.12.13
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申請(專利)號
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CN200510023780.2
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申請日期
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2005.02.03
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專利名稱
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核酸聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增的優(yōu)化方法
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主分類號
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C12P19/34(2006.01)I
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分類號
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C12P19/34(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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上海交通大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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李海闊;黃潔歡;張曉東;胡 鈞;樊春海;張治洲
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地址
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200240上海市閔行區(qū)東川路800號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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上海交達專利事務(wù)所
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代理人
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王錫麟;王桂忠
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項
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一種核酸聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增的優(yōu)化方法，其特征在于，通過向PCR體系中添加以下任一種優(yōu)化介質(zhì)材料：單質(zhì)鈦材料、單質(zhì)鎳材料、單質(zhì)鉍材料、單質(zhì)銻材料、單質(zhì)硒材料、單質(zhì)鉻材料來實現(xiàn)對PCR擴增的優(yōu)化，具體如下：(1)優(yōu)化介質(zhì)材料制備，是指：①以上單質(zhì)形式表現(xiàn)的各優(yōu)化介質(zhì)材料為絲狀、片狀、粒狀、粉狀、或膠體狀；②絲狀材料、片狀材料依次在無菌水、無水乙醇中反復(fù)清洗，晾干備用；粒狀、粉狀材料依次在無菌水、無水乙醇中清洗、沉淀，烘干備用；膠體狀材料市購即可；(2)以上材料使用前均用紫外線輻照滅菌；(3)PCR體系優(yōu)化，是指將適量的以上任一種材料加入PCR反應(yīng)體系當(dāng)中進行PCR擴增；(4)PCR產(chǎn)物檢測，對擴增后的DNA樣品進行瓊脂糖凝膠電泳，檢查擴增條帶，與對照體系進行比較；(5)優(yōu)化材料從反應(yīng)結(jié)束體系中的分離，需要回收擴增得到的PCR產(chǎn)物，則從反應(yīng)結(jié)束體系中分離出優(yōu)化材料。
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摘要
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一種核酸聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增的低成本優(yōu)化方法，通過向PCR體系中添加以下任一種優(yōu)化介質(zhì)材料：單質(zhì)鈦材料、單質(zhì)鎳材料、單質(zhì)鉍材料、單質(zhì)銻材料、單質(zhì)硒材料、單質(zhì)鉻材料來實現(xiàn)對PCR擴增的優(yōu)化，具體如下：(1)優(yōu)化介質(zhì)材料的準(zhǔn)備；(2)材料的滅菌；(3)PCR體系優(yōu)化；(4)PCR產(chǎn)物檢測；(5)優(yōu)化材料從反應(yīng)結(jié)束體系中的分離。本發(fā)明具有優(yōu)化擴增的效果顯著，操作更加簡便，成本低廉，易于保存，應(yīng)用廣泛，優(yōu)化材料易于從體系中分離等優(yōu)點。PCR擴增優(yōu)化方法對多種PCR體系都具有優(yōu)化作用，適用于各種PCR擴增，也適用于聚合酶延伸以及基于PCR方法基礎(chǔ)的其他生化方法，對基因檢測與克隆、遺傳分析、臨床診斷、基因芯片以及新材料等領(lǐng)域有著潛在而巨大的應(yīng)用價值。
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國際公布
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