公開(公告)號
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CN1249242C
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公開(公告)日
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2006.04.05
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申請(專利)號
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CN200310112640.3
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申請日期
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2003.12.10
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專利名稱
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非抗性篩選DNA疫苗載體及其構(gòu)建方法
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主分類號
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C12N15/63(2006.01)I
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分類號
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C12N15/63(2006.01)I;C12N15/31(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61K39/12(2006.01)I;A61P31/12(2006.01)I;A61P37/04(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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揚(yáng)州大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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焦新安;張曉明;潘志明;張曉榮;劉秀梵
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地址
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225009江蘇省揚(yáng)州市大學(xué)南路88號揚(yáng)州大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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揚(yáng)州市錦江專利事務(wù)所
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代理人
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江 平
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國省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項(xiàng)
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非抗性篩選DNA疫苗載體,其特征在于該載體全長3114bp,其序列為:gactcttcgcgatgtacgggccagatatacgcgttgacattgattattgactagttatta60atagtaatcaattacggggtcattagttcatagcccatatatggagttccgcgttacata120acttacggtaaatggcccgcctggctgaccgcccaacgacccccgcccattgacgtcaat180aatgacgtatgttcccatagtaacgccaatagggactttccattgacgtcaatgggtgga240ctatttacggtaaactgcccacttggcagtacatcaagtgtatcatatgccaagtacgcc300ccctattgacgtcaatgacggtaaatggcccgcctggcattatgcccagtacatgacctt360atgggactttcctacttggcagtacatctacgtattagtcatcgctattaccatggtgat420gcggttttggcagtacatcaatgggcgtggatagcggtttgactcacggggatttccaag480tctccaccccattgacgtcaatgggagtttgttttggcaccaaaatcaacgggactttcc540aaaatgtcgtaacaactccgccccattgacgcaaatgggcggtaggcgtgtacggtggga600ggtctatataagcagagctctctggctaactagagaacccactgcttactggcttatcga660aattaatacgactcactatagggagacccaagctggctagcgtttaaacttaagcttggt720accgagctcggatccactagtccagtgtggtggaattctgcagatatccagcacagtggc780ggccgctcgagtctagagggcccgtttaaacccgctgatcagcctcgactgtgccttcta840gttgccagccatctgttgtttgcccctcccccgtgccttccttgaccctggaaggtgcca900ctcccactgtcctttcctaataaaatgaggaaattgcatcgcattgtctgagtaggtgtc960attctattctggggggtggggtggggcaggacagcaagggggaggattgggaagacaata1020gcaggcatgctggggatgcggtgggctctatggcttctactgggcggttttatggacagc1080aagcgaaccggaattgccagctggcacatctctttgcaggaaaaaaacgctatgaaaaat1140gttggttttatcggctggcgcggaatggtcggctctgttctcatgcaacgcatggtagag1200gagcgcgatttcgacgctattcgccctgttttcttttctacctcccagtttggacaggcg1260gcgcccaccttcggcgacacctccaccggcacgctacaggacgcttttgatctggatgcg1320ctaaaagcgctcgatatcatcgtgacctgccagggcggcgattataccaacgaaatttat1380ccaaagctgcgcgaaagcggatggcagggttactggattgatgcggcttctacgctgcgc1440atgaaagatgatgccattattattctcgacccggtcaaccaggacgtgattaccgacggc1500ctgaacaatggcgtgaagacctttgtgggcggtaactgtaccgttagcctgatgttgatg1560tcgctgggcggtctctttgcccataatctcgttgactgggtatccgtcgcgacctatcag1620gccgcctccggcggcggcgcgcgccatatgcgcgagctgttaacccagatgggtcagttg1680tatggccatgtcgccgatgaactggcgacgccgtcttccgcaattcttgatattgaacgc1740aaagttacggcattgacccgcagcggcgagctgccggttgataactttggcgtaccgctg1800gcgggaagcctgatcccctggatcgacaaacagctcgataacggccagagccgcgaagag1860tggaaaggccaggcggaaaccaacaagattctcaatactgcctctgtgattccggttgat1920ggtttgtgtgtgcgcgtcggcgcgctgcgctgtcacagccaggcgttcaccatcaagctg1980aaaaaagaggtatccattccgacggtggaagaactgctggcggcacataatccgtgggcg2040aaagtggtgccgaacgatcgtgatatcactatgcgcgaattaaccccggcggcggtgacc2100ggcacgttgactacgccggttggtcgtctgcgtaagctgaacatggggccagagttcttg2160tcggcgtttaccgtaggcgaccagttgttatggggcgccgccgagccgctgcgtcgaatg2220ctgcgccagttggcgtagtggctattgcagcgcttatcgggcctgcgtgtggttctgtag2280gccggataaggcgcgtcagcgccgccatccggcggggaaatttgtgttaaaccaggggtg2340catcgtcaccctttttttgcgtaatacaggagtaaacgcagatgtcatgaccaaaatccc2400ttaacgtgagttttcgttccactgagcgtcagaccccgtagaaaagatcaaaggatcttc2460ttgagatcctttttttctgcgcgtaatctgctgcttgcaaacaaaaaaaccaccgctacc2520agcggtggtttgtttgccggatcaagagctaccaactctttttccgaaggtaactggctt2580cagcagagcgcagataccaaatactgtccttctagtgtagccgtagttaggccaccactt2640caagaactctgtagcaccgcctacatacctcgctctgctaatcctgttaccagtggctgc2700tgccagtggcgataagtcgtgtcttaccgggttggactcaagacgatagttaccggataa2760ggcgcagcggtcgggctgaacggggggttcgtgcacacagcccagcttggagcgaacgac2820ctacaccgaactgagatacctacagcgtgagctatgagaaagcgccacgcttcccgaagg2880gagaaaggcggacaggtatccggtaagcggcagggtcggaacaggagagcgcacgaggga2940gcttccagggggaaacgcctggtatctttatagtcctgtcgggtttcgccacctctgact3000tgagcgtcgatttttgtgatgctcgtcaggggggcggagcctatggaaaaacgccagcaa3060cgcggcctttttacggttcctgggcttttgctggccttttgctcacatgttctt。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種DNA疫苗載體以及構(gòu)建的方法,將擴(kuò)增的鼠傷寒沙門氏菌asd用pVUII和PagI雙酶切;用pVUII和PagI雙酶切質(zhì)粒pVAX1,去除卡那霉素抗性基因;然后將asd基因與去除卡那霉素抗性基因的載體進(jìn)行連接,構(gòu)成長度為3114bp的新型非抗性篩選DNA疫苗載體。本發(fā)明采用染色體-質(zhì)粒平衡致死系統(tǒng)代替抗生素抗性基因來作為DNA疫苗擴(kuò)增的選擇性標(biāo)記,構(gòu)建新型非抗性篩選DNA疫苗載體,從而避免了抗生素抗性基因的潛在性危險(xiǎn)問題。
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國際公布
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