| 公開(公告)號 | CN1227357C |
| 公開(公告)日 | 2005.11.16 |
| 申請(專利)號 | CN00807534.4 |
| 申請日期 | 2000.03.14 |
| 專利名稱 | 用于擴增核酸序列的方法 |
| 主分類號 | C12N15/10 |
| 分類號 | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1999.3.19 JP 76966/99;1999.12.27 JP 370035/99 |
| 申請(專利權(quán))人 | 寶生物工程株式會社 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 向井博之;山本純子;武田理;三宅一惠;上森隆司;佐藤好美;森山麻里子;椹木治久;萩屋道雄;淺田起代蔵;加藤郁之進 |
| 地址 | 日本大津市 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | 2000-03-14 PCT/JP2000/001534 |
| 進入國家日期 | 2001.11.13 |
| 專利代理機構(gòu) | 中國專利代理(香港)有限公司 |
| 代理人 | 姜建成 |
| 國省代碼 | 日本;JP |
| 主權(quán)項 | 一種擴增核苷酸序列或大量生產(chǎn)核酸的方法，其特征在于所述方法包括：(a)通過混合模板核酸、三磷酸脫氧核糖核苷酸、具有鏈置換活性的DNA聚合酶、至少一種引物和切割由引物產(chǎn)生的延伸鏈的內(nèi)切核酸酶制備反應(yīng)混合物，其中所述引物為與所述模板核酸的核苷酸序列基本互補而且包含脫氧核糖核苷酸和核糖核苷酸的嵌合寡核苷酸引物，所述核糖核苷酸位于所述引物的3’-末端或3’-末端側(cè)上；以及(b)在所述引物可特異性地退火至模板核酸上、發(fā)生延伸鏈合成反應(yīng)和所述DNA聚合酶的鏈置換反應(yīng)以及內(nèi)切核酸酶切割延伸鏈的反應(yīng)的條件下，溫育反應(yīng)混合物足夠時間，以產(chǎn)生反應(yīng)產(chǎn)物。 |
| 摘要 | 一種簡便有效擴增核酸序列的方法，其特征在于在存在嵌合寡核苷酸引物的情況下完成DNA合成反應(yīng)；一種提供大量DNA擴增片段的方法；一種通過聯(lián)用上述方法和另一種核酸序列擴增方法而擴增核酸序列的有效方法；一種檢測核酸序列的方法，它用于檢測或定量微生物，例如病毒、細菌、真菌或酵母；以及一種檢測上述方法原位獲得的DNA擴增片段的方法。 |
| 國際公布 | 2000-09-28 WO2000/056877 日 |
