| 公開(公告)號 | CN1206361C |
| 公開(公告)日 | 2005.06.15 |
| 申請(專利)號 | CN99119038.6 |
| 申請日期 | 1999.09.10 |
| 專利名稱 | 系列通用型腺病毒伴隨病毒載體的構(gòu)建及用途 |
| 主分類號 | C12N15/861 |
| 分類號 | C12N15/861;C12N7/01;C12N15/33;C12N15/79;C12N15/65;A61K48/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 本元正陽基因技術(shù)股份有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 吳小兵;侯云德;伍志堅;曹暉 |
| 地址 | 100176 北京市北京經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)永昌中路 6 號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項 | 保藏編號為CGMCCNO.0415.1的大腸埃希氏菌DH5α/pWAV-1攜帶的載體質(zhì)粒pWAV-1，含有2型AAV(AAV-2)基因組兩端的ITR，在兩個ITR之間依次為巨細胞病毒立早增強子和啟動子、多克隆位點和polyA信號，所述的pWAV-1多克隆位點包括NheI，XhoI，PstI和BamHI。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一系列通用型腺病毒伴隨病毒(adeno-associated virus，AAV)載體的構(gòu)建，這些載體包括pWAV-1、pWAV-2、pSNAV-1和pSNAV-2。其共同特征是每種載體均提供2型AAV兩端的ITR、巨細胞病毒(CMV)立早增強子和啟動子、多克隆位點和poly A信號。本發(fā)明提供了用上述通用型AAV載體構(gòu)建攜帶外源基因的AAV載體質(zhì)粒的方法。含有外源基因的AAV載體質(zhì)粒既可用于產(chǎn)生重組AAV，又可直接作為真核表達質(zhì)粒使用。pSNAV-1和pSNAV-2除具有上述共同特征外，還含有新霉素抗性基因表達盒。本發(fā)明利用這一特征，提供了用含有外源基因的pSNAV-1或pSNAV-2質(zhì)粒建立穩(wěn)定攜帶AAV載體的細胞株的方法。本發(fā)明進一步提供了“一株載體細胞/一株輔助病毒”的重組AAV生產(chǎn)方法，即用我們先前發(fā)明的一種用于重組AAV大規(guī)模生產(chǎn)的全功能輔助病毒(已申報專利，申請?zhí)?8120033.8)感染AAV載體細胞株，實現(xiàn)重組AAV的大規(guī)模生產(chǎn)。 |
| 國際公布 |
