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一種精氨酸酯酶的制備方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1143893C  
公開(kāi)(公告)日 2004.03.31  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN01144317.0  
申請(qǐng)日期 2001.12.14  
專利名稱 一種精酸酯酶的制備方法  
主分類號(hào) C12N9/18  
分類號(hào) C12N9/18;A61P1/16  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 周肖林;陳遠(yuǎn)聰  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 周肖林;陳遠(yuǎn)聰  
地址 333000 江西省景德鎮(zhèn)經(jīng)公橋蛇類研究所  
頒證日 2004.03.31  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司  
代理人 朱黎光;張占榜  
國(guó)省代碼 江西;36  
主權(quán)項(xiàng) 一種精氨酸酯酶的制備方法,其特征是該方法包括如下步驟:步驟a:取江浙蝮蛇毒凍干粉溶于0.05Mtris-HCl,pH7.8緩沖液中,4℃下離心除去不溶物,取上清液;步驟b:上清液先經(jīng)DEAE纖維素DE-52柱層析,層析柱先用Tris-HCl緩沖液平衡后,用含NaCl的緩沖液從0至0.5M進(jìn)行梯度洗脫,收集含精氨酸酯酶活性的組分,濃縮,去鹽后,進(jìn)行下一步分離;步驟c:用CM-Sepharose柱層析分離,平衡液是0.05M酸鈉pH5.0緩沖液,洗脫液含0至0.5MNaClpH5.0的醋酸鈉緩沖液梯度洗脫,收集含精氨酸酯酶活性組分,濃縮,去鹽后再做下一步分離;步驟d:用Sephadex-75柱層析疑膠過(guò)濾分離,洗脫液為0.05MNaHCO3含0.1MNaCl溶液,收集精氨酸酯酶組分,濃縮,去鹽,凍干后得產(chǎn)品。  
摘要 本發(fā)明涉及從江浙蝮蛇毒中提取肝活素的方法,這種肝活素的主要成分為精氨酸酯酶,其藥理功能是降低血粘度,改善微循環(huán),對(duì)肝炎病毒感染細(xì)胞的發(fā)展有抑制作用,能促進(jìn)肝功能的恢復(fù)。由于江浙蝮蛇毒中含有神經(jīng)毒素和出血毒素等有害成分,本發(fā)明的方法是利用經(jīng)過(guò)三柱層板分離純化,能將這些毒性物質(zhì)除掉,精氨酸酯酶的含量達(dá)90%以上。動(dòng)物試驗(yàn)表明毒性很小,試驗(yàn)劑量為臨床用量的數(shù)十倍,因而可保證臨床用藥安全。  
國(guó)際公布  
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