(一)形態(tài)結(jié)構(gòu)
單純皰疹病毒(Herpes simplex virus,HSv)呈球形,完整病毒由核心、衣殼、被膜(Tegument)及囊膜組成。核心含雙股DNA,纏繞成纖絲卷軸。衣殼呈二十面體對(duì)稱,由162個(gè)殼微粒組成,直徑為100nm 。衣殼外一層被膜復(fù)蓋,厚薄不勻,最外層為典型的脂質(zhì)雙層囊膜,上有突起。有囊膜的病毒直徑為150~200nm。囊膜表面含gb 、 gC、 gD、 gE、 gG、 gH糖蛋白,與病毒對(duì)細(xì)胞吸附/穿入( gB gC gD ge )、控制病毒從細(xì)胞核膜出芽釋放(gH)及誘導(dǎo)細(xì)胞融合(gb gC gD gH)有關(guān)。并有誘生中和抗體(gd 最強(qiáng))和細(xì)胞毒作用(已知的HSV糖蛋白均可)。
(二)基因結(jié)構(gòu)
HSV基因組為一線性DNA分子,由共價(jià)連接的長片段(L)和短片段(S)組成。每片段均含有單一序列和反轉(zhuǎn)重復(fù)序列;蚪M中有72個(gè)基因,共編碼70多種各異的蛋白質(zhì),其中除24種蛋白的特性還不清楚外,有18種編碼蛋白組成病毒DNA結(jié)合蛋白及各種酶類,參予病毒DNA合成,包裝及核苷酸的代謝等。30多種不同蛋白組成病毒結(jié)構(gòu)蛋白(如衣殼蛋白、囊膜蛋白),在保護(hù)HSV的DNA,以及HSV的致病作用和誘導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答中起重要作用。
(三)培養(yǎng)特性
HSV可在多種細(xì)胞中生長,常用的細(xì)胞系有BHK細(xì)胞,Vero細(xì)胞、 Hep-2細(xì)胞等。病毒初次分離時(shí),原代乳兔腎細(xì)胞、人胚肺細(xì)胞較敏感。HSV感染動(dòng)物范圍廣泛,多種動(dòng)物腦內(nèi)接種可引起皰疹性腦炎,小白鼠是足墊接種可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)致死性感染,家兔角膜接種引起皰疹性角膜炎,豚鼠陰道內(nèi)接種可引起宮頸炎和宮頸癌。接種雞胚絨毛尿囊膜上,形成增殖性白色斑塊。
(四)分型
HSV有二個(gè)血清型,即HSV—1和HSV—2,兩型病毒核苷酸序列有5%同源性,型間有共同抗原,也有特異性抗原,可用型特異性單克隆抗體作ELISA,DNA限制性酶切圖譜分析及DNA雜交試驗(yàn)等方法區(qū)分型別。
病人和健康是傳染源,主要通過直接密切接觸和性接觸傳播。HSV經(jīng)口腔、呼吸道、生殖道粘膜和破損皮膚等多種途徑侵入機(jī)體。人感染非常普遍,感染率達(dá)80~90%,常見的臨床表現(xiàn)是粘膜或皮膚局部集聚的皰疹,偶而也可發(fā)生嚴(yán)重的全身性疾病,累及內(nèi)臟。
(一)原發(fā)感染
6個(gè)月以內(nèi)嬰兒多從母體通過胎盤獲得抗體,初次感染約90%無臨床癥狀,多為隱性感染。HSV—1原發(fā)感染常發(fā)生于1~15歲,常見的有齦口炎,系在口頰粘膜和齒齦處發(fā)生成群皰疹,破裂后,多蓋一層壞死組織。此外可引起唇皰疹、濕疹樣皰疹、皰疹性角膜炎、皰疹性腦炎等。生殖器皰疹多見于14歲以后由HSV—2引起,比較嚴(yán)重,局部劇痛,伴有發(fā)熱全身不適及淋巴結(jié)炎。
(二)潛伏感染和復(fù)發(fā)
HSV原發(fā)感染產(chǎn)生免疫力后,將大部分病毒清除,部分病毒可沿神經(jīng)髓鞘到達(dá)三叉神經(jīng)節(jié)(HSV—1)和脊神經(jīng)節(jié)(HSV—2)細(xì)胞中或周圍星形神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi),以潛伏狀態(tài)持續(xù)存在,與機(jī)體處于相對(duì)平衡,不引起臨床癥狀。當(dāng)機(jī)體發(fā)熱、受寒、日曬、月經(jīng)、情緒緊張,使用垂體或腎上腺皮質(zhì)激素,遭受某些細(xì)菌病毒感染等,潛伏的病毒激活增殖,沿神經(jīng)纖維索下行至感覺神經(jīng)末梢,至附近表皮細(xì)胞內(nèi)繼續(xù)增殖,引起復(fù)發(fā)性局部皰疹。其特點(diǎn)是每次復(fù)發(fā)病變往往發(fā)生于同一部位。最常見在唇鼻間皮膚與粘膜交界處出現(xiàn)成群的小皰疹。皰疹性角膜炎、皰疹性宮頸炎等亦可反復(fù)發(fā)作。
(三)先天性感染
HSV通過胎盤感染,影響胚胎細(xì)胞有絲分裂,易發(fā)生流產(chǎn)、造成胎兒畸形、智力低下等先天性疾病。約40~60%的新生兒在通過HSV—2感染的產(chǎn)道時(shí)可被感染,出現(xiàn)高熱、呼吸困難和中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變,其中60~70%受染新生兒可因此而死亡,幸存者中后遺癥可達(dá)95%。
(四)致癌關(guān)系
一些調(diào)查研究表明HSV—1和HSV—2可能分別與唇癌、外陰癌及子宮頸癌有關(guān),特別HSV—1作為宮頸癌的病因,曾受到人們重視,但近年研究表明人乳頭瘤病毒與該癌有直接關(guān)系,因此宮頸癌成因也許是復(fù)雜的。
HSV原發(fā)感染后1周左右血中可出現(xiàn)中和抗體,3-4周達(dá)高峰,可持續(xù)多年。中和抗體在細(xì)胞外滅活病毒,對(duì)阻止病毒經(jīng)血流播散和限制病程有一定作用,但不能消滅潛伏感染的病毒和阻止復(fù)發(fā)。機(jī)體抗HSV感染的免疫中,細(xì)胞免疫起更重要作用,NK細(xì)胞可特異性殺死HSV感染細(xì)胞;在抗體參予下,介導(dǎo)ADCC效應(yīng)亦可將HSV感染細(xì)胞裂解;細(xì)胞毒性T細(xì)胞和各種淋巴分子(如干擾素等),在抗m.bhskgw.cn/Article/HSV感染中也有重要意義。
(一)病毒分離
采取病人唾液,脊髓液及口腔、宮頸、陰道分泌液,或角膜結(jié)膜刮取物等接種易感細(xì)胞中培養(yǎng)1~2天,出現(xiàn)細(xì)胞腫用脹,變圓,相互融合等病變,可作初步診斷。然后用免疫熒光法(IFA),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行鑒定,確診HSV。必要時(shí)進(jìn)行分型。
(二)抗原檢測(cè)
同上標(biāo)本,用IFA、ELISA等方法直接檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)或分泌液中抗原,快速診斷HSV感染。
(三)抗體檢測(cè)
用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn),ELISA檢測(cè)病人血清中的抗體,可用于原發(fā)感染診斷,但不能與復(fù)發(fā)感染區(qū)別,因人群HSV感染率高,廣泛存在潛伏感染,血清中普遍含較高抗體水平,則復(fù)發(fā)感染時(shí)很難觀察到抗體效價(jià)上升。而檢測(cè)脊髓液抗體,對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)HSV感染有重要意義。
此外用DNA分子雜交法和PCR法檢測(cè)HSV DNA,已顯示較大優(yōu)越性,F(xiàn)多用于實(shí)驗(yàn)研究,將在臨床推廣應(yīng)用。
(一)預(yù)防
由于HSV有致癌可能性,減毒活疫苗和死疫苗不宜用于人體,F(xiàn)研究中的各種疫苗如囊膜蛋白(提純的gG、gD)亞單位疫苗,gB、gD基因重組痘苗病毒疫苗和多肽疫苗,在動(dòng)物試驗(yàn)中顯示良好效果,有應(yīng)用前景。
孕婦產(chǎn)道HSV—2感染,分娩后可給新生兒注射丙種球蛋白作緊急預(yù)防。
(二)治療
皰疹凈(IDU)、阿糖胞苷(Ara—C)、阿糖腺苷(Ara—A)、溴乙烯尿苷(BVDU)等治療皰疹性角膜炎有效,與干擾素合用可提高效力。國內(nèi)用HSv gC gD單克隆抗體制成滴眼液,用于治療皰疹性角膜炎,取得顯著療效。
無環(huán)鳥苷(ACV)對(duì)皰疹病毒選擇性很強(qiáng)的藥物。ACV必須經(jīng)HSV的胸腺核苷激酶(TK)激活后磷酸化為一磷化ACV,再經(jīng)細(xì)胞激酶磷酸化為二三磷酸化ACV。ACV—ATP對(duì)dGTP有極強(qiáng)的競(jìng)爭(zhēng)性,故可終止病毒DNA合成。ACV主要用于治療生殖器皰疹感染,使局部排毒時(shí)間縮短,提早局部愈合。此外ACV還常用于治療唇皰疹、皰疹性腦炎、新生兒皰疹,皰疹性角膜炎等,均有療效。
阿糖腺苷(Ara—A)系通過宿主激酶作用就可磷酸化成有活性的Ara—ATP,選擇性地抑制HSV多聚酶,終止病毒DNA合成。由于Ara—A不m.bhskgw.cn/wsj/需HSv TK酶的作用,故可用于耐ACV毒株(TK-株)感染的治療。能防止皰疹性角膜炎病變嚴(yán)重惡化,減低皰疹必性腦炎和HSV全身感染的死亡率。