方法名稱: |
不同品種辣椒藥材—辣椒堿—HPLC |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于不同品種辣椒風(fēng)濕貼中辣椒堿含量的測定 |
方法原理: |
本品粗粉加95 %乙醇置恒溫水浴鍋中60 ℃減壓回流提取,經(jīng)液相色譜分離,在281 nm處測定峰面積,外標(biāo)法計算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器 日本島津高效液相色譜儀(LC-10ATVP溶劑輸入泵,SPD-10AVP 紫外檢測器),HW-2000色譜工作站(南京千譜軟件有限公司 色譜條件 色譜柱:DiamonsilTM(鉆石)C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm,迪馬公司);流動相:甲醇-水-磷酸(70︰30︰0.1);流速:1.0 mL/min;檢測波長:281 nm;柱溫:30 ℃ |
試樣制備: |
對照品溶液制備 精密稱取辣椒堿對照品25.15 mg,置于50 mL容量瓶中,加95 %乙醇溶解并稀釋至刻度,得辣椒堿濃度為503 μg/mL的對照品貯備液,用時適當(dāng)稀釋。 供試品溶液制備 取本品粗粉約6.0 g,精密稱定,置于250 mL圓底燒瓶中,加入9倍量(V/W)95 %乙醇,置于恒溫水浴鍋中60 ℃減壓回流提取2.0 h,殘渣加等量95 %乙醇再提取1次,合并2次提取液,并用95 %乙醇定容至108 mL,0.45 μm微孔濾膜過濾,即得。 |
操作步驟: |
分別精密吸取辣椒堿對照液以及辣椒供試品溶液各20 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算辣椒堿含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
李堅,龍曉英,孫娟等.HPLC法測定不同品種辣椒藥材中辣椒堿的含量.中藥新藥與臨床病理. 2006. 17(3): 202~205 |