方法名稱： |
蘆薈—β-胡蘿卜素—RP-HPLC |
應(yīng)用范圍： |
本方法適用于蘆薈中β-胡蘿卜素含量的測(cè)定 |
方法原理： |
本品勻漿加入丙、石油醚提取，經(jīng)液相色譜分離，在450 nm處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 Waters515液相色譜儀（美國Waters公司)，配用2487 紫外檢測(cè)器，Millenium32色譜工作站 色譜條件 色譜柱：Supelco（2.5 mm×250 mm，4 μm)；流動(dòng)相：甲醇∶氯仿=85∶15（v/v)；流速：0.5 mL/min；檢測(cè)波長：450 nm |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 精密稱取β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品置于容量瓶中，以三氯甲烷溶解并稀釋至刻度，配制適宜濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。 供試品溶液制備 取勻漿樣品1～5 g置于100 mL具塞錐形瓶中，加入丙酮20 mL，石油醚5 mL，振搖10 min，靜置5 min，將提取液轉(zhuǎn)入盛有100 mL 5 %硫酸鈉液的分液漏斗中，于錐形瓶中加入10 mL丙酮- 石油醚混合液（3∶7 v/v)提取，將提取液并入分液漏斗中。如此提取2～3次，直至提取液使無色為止。將上述提取液經(jīng)5 %硫酸鈉溶液洗滌后，進(jìn)行濃縮，并用氮?dú)獯蹈�，加�? mL甲醇溶解、過濾，即得。 |
操作步驟： |
分別精密吸取β-胡蘿卜素對(duì)照液以及蘆薈供試品溶液適量，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算β-胡蘿卜素含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
雷紹榮，歐陽華學(xué).反相高效液相色譜法測(cè)定蘆薈中β-胡蘿卜素含量.西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2005. 18（6)： 874～875 |
